[发明专利]人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液，包括：1mol/L～8mol/L胍盐、1mM～20mM金属离子螯合剂和pH7.5～8.0的100mM Tris‑HCl缓冲溶液，其中，胍盐选自盐酸胍、异硫氰酸胍和硫氰酸胍中的至少一种，金属离子螯合剂选自乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸的水溶性盐中的至少一种。优选地，还包括1％体积～20％体积的表面活性剂，表面活性剂为非离子型去污剂，非离子型去污剂选自Tween‑20、Tween‑80、Brij‑35、NP40和Triton‑100中的至少一种。还提供了相关制备方法和应用。本发明的裂解液能够快速高效裂解细胞，充分释放核酸，满足后续核酸检测用量，适于大规模推广应用。

技术领域

本发明涉及核酸提取技术领域，特别涉及核酸提取裂解液技术领域，具体是指一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液、及其制备方法和应用。

背景技术

粪便作为一种常见的临床样本，其含有的大量核酸信息，可用于相关肿瘤的检测，其中最为常见的用途是用于结直肠癌的诊断。

大量研究表明，粪便既含有脱落的正常结直肠上皮细胞和游离的DNA，也含有大量从结直肠癌上脱落的癌细胞和游离的癌DNA；又由于肠道是碱性环境，有利于DNA的保存，使从粪便中提取的DNA质量较好。因此，粪便DNA是进行消化道肿瘤分子检测、分子诊断的最佳标本。

但是粪便成分十分复杂，样本中杂质较多，如食物残渣、胆盐、胆红素、腐殖质、色素等，使得粪便样本中核酸的纯化与富集具有较大的难度。

常规的核酸裂解液用于粪便样本很难获得高纯度和高得率的核酸，且难以满足后续相关肿瘤检测所需的用量。

因此，需要提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液，其能够快速高效裂解细胞，充分释放核酸，使得利用少量粪便样本获得较高纯度和得率的核酸成为可能，满足后续核酸检测用量，还能够减少样本处理所需的各类有毒试剂，安全环保。

发明内容

为了克服上述现有技术中的缺点，本发明的一个目的在于提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液，其能够快速高效裂解细胞，充分释放核酸，使得利用少量粪便样本获得较高纯度和得率的核酸成为可能，满足后续核酸检测用量，适于大规模推广应用。

本发明的另一目的在于提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液，其设计巧妙，配制简便，成本低，还能够减少样本处理所需的各类有毒试剂，安全环保，适于大规模推广应用。

本发明的另一目的在于提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液的配制方法，采用该方法配制的人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液能够快速高效裂解细胞，充分释放核酸，使得利用少量粪便样本获得较高纯度和得率的核酸成为可能，满足后续核酸检测用量，适于大规模推广应用。

本发明的另一目的在于提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液的配制方法，其设计巧妙，配制简便，成本低，还能够减少样本处理所需的各类有毒试剂，安全环保，适于大规模推广应用。

本发明的一个目的在于提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液在人粪便中脱落细胞核酸提取中的应用，其能够快速高效裂解细胞，充分释放核酸，使得利用少量粪便样本获得较高纯度和得率的核酸成为可能，满足后续核酸检测用量，适于大规模推广应用。

本发明的一个目的在于提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液在人粪便中脱落细胞核酸提取中的应用，其设计巧妙，操作简便，成本低，还能够减少样本处理所需的各类有毒试剂，安全环保，适于大规模推广应用。

为达到以上目的，在本发明的第一方面，提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液，其特点是，包括以下组分和用量：

胍盐 1mol/L～8mol/L，

金属离子螯合剂 1mM～20mM，和