[发明专利]一种具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法

权利要求书

1.一种具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于所述方法按如下步骤进行：

(1)将新鲜老鹰茶叶清洗、烘干后粉碎并过20目筛，获得老鹰茶叶粉末，将老鹰茶叶粉末与水以质量比1:8～10混合后，在室温下搅拌浸泡广5小时，然后升温至85～100℃下加热回流浸提2～3h，冷却至30～50℃后过滤，获得滤液，即老鹰茶叶水提物；

(2)在步骤(I)获得的老鹰茶叶水提物中搅拌加入絮凝剂，在室温下静置4～6小时，然后离心，弃去沉淀，获得上清液a；所述絮凝剂为海藻酸钠、壳聚糖或羧甲基纤维素；

(3)将步骤(2)获得的上清液a减压浓缩后加入乙醇水溶液使乙醇体积终浓度为70～90％，静置12小时后，取上清液b减压浓缩至浓缩物无乙醇味，获得浸膏；

(4)将步骤(3)获得的浸膏加水配成混合液，再将混合液用萃取剂在50～80℃条件下搅拌30～90分钟进行萃取，萃取完全后冷却至30～40℃，静置分层，获得上层萃取液和下层萃余液，将上层萃取液减压浓缩至混合液体积的0.3～0.5倍，即得老鹰茶叶黄酮粗提液；所述萃取剂由有机溶剂A和有机溶剂B以体积比为1000:1混合组成，有机溶剂A为乙酸乙酯或乙酸乙酯与异丙醇以体积比5～9:1的混合溶液；有机溶剂B为乙酸；

(5)以IDC为背景电解质的毛细管电泳-间接紫外法测定老鹰茶提取物中草酸、甲酸、苹果酸、柠檬酸、L-半胱氨酸、L-谷氨酸、乙酸和黄酮的含量。

2.如权利要求1所述的具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤(2)所述絮凝剂以质量浓度1～5％絮凝剂水溶液的形式加入。

3.如权利要求2所述的具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤(2)所述絮凝剂水溶液与老鹰茶叶水提物体积比为1～5:1000。

4.如权利要求2所述的具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤(2)所述絮凝剂以质量浓度1％絮凝剂水溶液的形式加入，絮凝剂水溶液与老鹰茶叶水提物体积比为2:1000。

5.如权利要求1所述的具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于将步骤(2)获得的上清液a体积减压浓缩至步骤(I)获得的老鹰茶叶水提物体积的l/20倍，加入体积浓度95％乙醇水溶液使乙醇体积终浓度为70～90％。

6.如权利要求1所述的具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤(4)中所述萃取剂由有机溶剂A和有机溶剂B以体积比为1000:2混合组成，有机溶剂A为乙酸乙酯或乙酸乙酯与异丙醇以体积比8:1的混合液；有机溶剂B为乙酸。

7.如权利要求7所述的具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤(4)中所述萃取剂的体积用量与混合液的体积比为2～5:1。

8.如权利要求1所述的具有降血糖活性老鹰茶叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤(5)中按如下步骤进行：将步骤(4)获得老鹰茶叶黄酮粗提液取2ml样品溶液，与等量2ml乙腈混合，强力振摇，静置后取适量溶液于10000rpm转速离心10min，上清液用0.45μm滤膜过滤，再适当稀释或直接进样测定。