[发明专利]一种同时测定芦丁和柚皮苷含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种同时测定中药材、中药提取物或中药制剂中芦丁和柚皮苷含量的方法，属于中药技术领域。

背景技术

痔疮是一种常见病、多发病，中国自古就有“十人九痔”之说。痔疮是肛垫病理性肥大移位及肛周皮下血管丛血流瘀滞形成的团块，属肛肠疾病。其主要临床表现为便血、疼痛、水肿、坠胀、瘙痒、局部不适、分泌物增多或脱出等症状。有关研究表明：我国痔疮的发病率约为46％，有些地区成人中占70％。许多患者因痔疮二出现便血、脱出和疼痛等症状，严重影响工作、学习和生活，因此痔疮治疗药物的研发具有重要的价值。目前治疗痔疮的方法主要有药物治疗、手术治疗两种，我国肛肠学界对痔疮的治疗标准明确指出“一切治疗的目的不是消除痔体，而是消除症状，解除痔疮的症状要比改变痔体的大小更有意义，应被视作治疗效果的标准”。现在大多数肛肠科专家的意见是90％以上的痔疮患者可以采用非手术治疗，只有不到10％的痔疮患者需要外科治疗。药物疗法既能消肿止痛、缓解症状，又可避免手术治疗的疼痛以及并发症。

传统中医学在痔疮的治疗方面具有非常丰富的临床经验，并且历代记载了很多具有很好临床疗效的中药方剂，如槐角丸、槐花散、枳壳散、槐角地榆丸、净固丸等，这些方剂中均以槐花(槐角)或枳壳为主要药材。并且槐花和枳壳也被认为是治疗痔疮的经典药对。中药化学研究表明：槐花的主要有效成分为芦丁等，枳壳的主要有效成分为柚皮苷和新橙皮苷等。中国专利申请号200710124647.5，名称为“一种抗痔疮药物组合物”文献公开了含芦丁、柚皮苷重量百分比为0.8-4︰1的抗痔疮组合物，具有显著的抗痔疮作用，并具体公开了两种制备方法。中国专利申请号200810216984.1，名称为“含芦丁、柚皮苷的抗痔疮提取物的制备方法”公开了一种含有芦丁、柚皮苷的抗痔疮提取物的大孔树脂制备工艺。

《中国药典》(2015版)中，分别有槐花中芦丁，枳壳、枳实中柚皮苷的含量测定方法；文献《HPLC双波长法同时测定净固片中5种活性成分的含量》中，对由槐花、枳壳组成的中药制剂净固片中的芦丁、柚皮苷等5种成分进行了含量测定报道。但是对于复方中药制剂的质量控制而言，过多或过少的指标成分的含量测定控制方法都不利于现阶段中药质量标准的可控及可实现。为了更好地对含芦丁和柚皮苷成分的中药材、中药提取物和中药制剂进行有效、可行地质量控制，本发明深入研究，并建立了同时测定芦丁和柚皮苷含量的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够快速、准确地同时测定中药材、中药提取物和中药制剂中芦丁和柚皮苷含量的方法，具体地提供一种用高效液相色谱法测定中药材、中药提取物和中药制剂中芦丁和柚皮苷含量的方法。

本发明所述方法包括：

本发明所述方法包括：

(1)分别取芦丁和柚皮苷标准品及含有芦丁和柚皮苷成分的中药材、中药提取物或中药制剂供试品溶于甲醇水溶液中，分别制成标准溶液及供试品溶液；

(2)分别取等体积的标准溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪中，然后测定标准品溶液和供试品溶液的峰面积并进行计算，即得供试品中芦丁和柚皮苷的含量。其中，所述高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-缓冲盐溶液。

本发明方法中，作为优选的实施方案，所述碳十八烷基键合硅胶的粒径为≤5μm，优选为5μm，4μm，3.5μm，进一步优选为5μm。

本发明所述流动相为乙腈-缓冲盐溶液，优选为：乙腈-0.05mol/l醋酸铵溶液(17︰83)。

本发明所述的缓冲盐溶液为醋酸铵、磷酸氢铵、磷酸二氢铵、醋酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠，缓冲盐溶液的浓度为0.01mol/l～0.5mol/l，优选为0.05mol/l的醋酸铵。

本发明所述的“一种同时测定芦丁和柚皮苷含量的方法”可以用于任何包含槐花(槐角)、枳壳(枳实)药材的中药复方，及其提取物，及其各种药物剂型，如片剂、胶囊、口服液、注射剂、颗粒剂等成药中芦丁和柚皮苷含量的同时测定。

作为优选的实施方案，所述的“一种同时测定芦丁和柚皮苷含量的方法”，包括：

步骤1，标准品溶液的制备：精密称取芦丁和柚皮苷标准品适量，加70％甲醇水溶液溶解，制成每1ml分别含芦丁0.10mg和柚皮苷0.04mg的混合标准品溶液。

步骤2，供试品溶液的制备：取含有芦丁和柚皮苷的中药材、中药提取物或中药制剂供试品，粉碎，精密称取60mg，置25ml量瓶中，加70％甲醇水溶液20ml，超声提取，放冷，加70％甲醇水溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。