[发明专利]载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法、载药载氧杂交蛋白纳米粒和应用

权利要求书

1.一种载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（a）将还原剂与血清白蛋白混合均质，进行还原反应，将血清白蛋白分子内部的二硫键断开，得到无规状态的还原型血清白蛋白；

（b）将还原型血清白蛋白、血红蛋白和药物在有氧条件下混合均质，还原型血清白蛋白分子与血红蛋白的游离巯基发生交联，重构成分子间二硫键，形成杂交蛋白纳米载体，并且在二硫键重构阶段，杂交蛋白纳米载体能够包载药物并结合氧气，形成载药载氧杂交蛋白纳米粒；

血红蛋白与血清白蛋白的质量比为1：（2-50），血清白蛋白与还原剂的质量比为1：（0.1-1）。

2.根据权利要求1所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述血红蛋白来源于动物。

3.根据权利要求2所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述血红蛋白来源于人、牛或猪。

4.根据权利要求1所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述血清白蛋白来源于动物或采用生物发酵方式获得。

5.根据权利要求4所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述血清白蛋白来源于人或牛。

6.根据权利要求4所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述血清白蛋白为生物发酵方式获得的重组人血清白蛋白。

7.根据权利要求1所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述还原剂选自谷胱甘肽、二硫苏糖醇、半胱氨酸或同型半胱氨酸中的至少一种。

8.根据权利要求1所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述药物为化疗药物和/或光敏剂；

所述化疗药物选自盐酸阿霉素、甲氨蝶呤或金丝桃素中的至少一种；

所述光敏剂选自吲哚菁绿、血卟啉、原卟啉或二氢卟吩-e6中的至少一种。

9.根据权利要求1所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，血红蛋白与血清白蛋白的质量比为1：（3-15），血清白蛋白与还原剂的质量比为1：（0.15-0.5）。

10.根据权利要求9所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，血红蛋白与血清白蛋白的质量比为1：（5-10）；血清白蛋白与还原剂的质量比为1：（0.15-0.3）。

11.根据权利要求1所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，在步骤（b）中，还原型血清白蛋白、血红蛋白和药物的混合溶液的pH值为7-9；

混合均质时间为10-180分钟；

还原型血清白蛋白的浓度为0.5-3%。

12.根据权利要求1-11任一项所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，在步骤（b）中，先将还原型血清白蛋白与血红蛋白及药物在有氧条件下混合均质，然后加入沉淀剂混合均匀，最后通过真空干燥、超滤或透析将沉淀剂和游离蛋白及药物去除，即制得载药载氧杂交蛋白纳米粒。

13.根据权利要求12所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述沉淀剂为无水低碳醇。

14.根据权利要求13所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述沉淀剂为无水乙醇。

15.根据权利要求12所述的载药载氧杂交蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，还原型血清白蛋白、血红蛋白和药物的混合溶液与沉淀剂的体积比为1：（1-2.5）；

还原型血清白蛋白、血红蛋白和药物混合溶液与沉淀剂的混合时间为0.5-12小时。