[发明专利]一种磷脂酶D的生产工艺以及磷脂酶D制品在审
| 申请号： | 201711213596.3 | 申请日： | 2017-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN107723282A | 公开（公告）日： | 2018-02-23 |
| 发明（设计）人： | 薛峰;丁鸽;修元松;张丽;高健 | 申请（专利权）人： | 盐城工学院 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N1/20;C12R1/465 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人： | 魏彦 |
| 地址： | 224000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 磷脂酶 生产工艺 以及 制品 | ||
1.一种磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，其包括：发酵步骤；
所述发酵步骤包括：将具有生产磷脂酶D性能的褐色链霉菌接种至液体发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵液；
其中，所述液体发酵培养基含有：葡萄糖4.5-5.5g/L、蛋白胨4.5-5.5g/L、酵母浸粉4.5-5.5g/L、柠檬酸三钠4.5-5.5g/L、KH2PO4 1.8-2.2g/L以及MgSO4 0.48-0.52g/L，pH 6.8-7.2。
2.根据权利要求1所述的磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，所述发酵培养的条件为：压力0.048-0.052Mpa、温度34-36℃、搅拌速度80-120rpm、溶氧25-35％。
3.根据权利要求1或2所述的磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，所述生产工艺还包括：磷脂酶D纯化步骤；
所述磷脂酶D纯化步骤包括：将所述发酵液经板框过滤、超滤浓缩、盐析以及冻干后，得到磷脂酶D成品。
4.根据权利要求3所述的磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，所述板框过滤的压力为0.2-0.3MPa、温度为15-30℃、流速300-500L/h。
5.根据权利要求3所述的磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，所述超滤浓缩所用的超滤膜的分子截留量为10-30KDa、流速为100-200L/h。
6.根据权利要求3所述的磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，所述盐析为：按质量体积分数比为48-52％的量，往经过所述超滤浓缩后的得到发酵浓缩液中加入固体(NH4)2SO4。
7.根据权利要求1所述的磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，所述生产工艺还包括：菌种活化步骤；
所述菌种活化步骤为：将链霉菌属菌株接种至固体活化培养基，待长出单菌落后，挑取单菌落接种至含液体活化培养基的摇瓶中，置于34-36℃、140-160rpm条件下，培养48-72h，得到用于接种至所述液体发酵培养基的种子液。
8.根据权利要求7所述的磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，所述固体活化培养基含有：葡萄糖4.5-5.5g/L、蛋白胨4.5-5.5g/L、酵母浸粉4.5-5.5g/L、柠檬酸三钠4.5-5.5g/L、KH2PO4 1.8-2.2g/L、MgSO4 0.48-0.52g/L以及琼脂18-22g/L，pH 6.8-7.2。
9.根据权利要求7所述的磷脂酶D的生产工艺，其特征在于，所述液体活化培养基含有：葡萄糖4.5-5.5g/L、蛋白胨4.5-5.5g/L、酵母浸粉4.5-5.5g/L、柠檬酸三钠4.5-5.5g/L、KH2PO4 1.8-2.2g/L以及MgSO4 0.48-0.52g/L，pH 6.8-7.2。
10.一种磷脂酶D制品，其特征在于，其根据权利要求1-9中任一项所述的磷脂酶D的生产工艺制得。
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