[发明专利]高产左旋内酯水解酶的黑曲霉菌株BFA010-7及其在制备D-泛解酸内酯中的应用

权利要求书

1.一种高产左旋内酯水解酶的黑曲霉(Aspergillus niger)菌株BFA010-7，其特征在于：该菌株已于2017年11月03日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No：14631。

2.根据权利要求1所述的黑曲霉菌株BFA010-7，其特征在于：该菌株的ITS 1和ITS 4序列的核酸序列分别如序列表中SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。

3.权利要求1所述的黑曲霉菌株BFA010-7在制备D-泛解酸内酯中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：其步骤包括：

(1)细胞固定化培养：将权利要求1所述的黑曲霉菌株BFA010-7接种到含有海绵块的无菌培养液中进行培养；

(2)细胞化学交联：在步骤(1)的培养液中加入戊二醛进行丝状真菌细胞共价自交联，然后分离获得海绵包埋的固定化细胞；

(3)将步骤(2)的固定化细胞添加到外消旋泛解酸内酯的水溶液中，催化D-泛解酸内酯的水解反应，获得D-泛解酸；

(4)分离上述步骤(3)的反应液中的固定化细胞，固定化细胞可重复利用，使用有机溶剂萃取分离除去步骤(3)中未水解的D-泛解酸内酯和L-泛解酸内酯；

(5)对上述步骤(4)中有机溶剂萃取剩余的水相溶液进行酸化处理，使步骤(4)中的水解产物D-泛解酸转化为D-泛解酸内酯，再用有机溶剂萃取得到目标产物D-泛解酸内酯。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：步骤(1)中，黑曲霉菌丝体生长在海绵块的内部和表面。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：步骤(1)中，无菌培养液中，海绵块的体积密度为50～500cm³/L，培养温度为25～35℃。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述固定化细胞的对映选择率高于200，重复使用的半衰期超过200批次。

8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：还包括步骤(6)：当固定化细胞的活力低于原始固定化细胞活力的一半时，将固定化细胞再加到无菌培养液中进行复活增殖培养，实现固定化细胞的活力再生。