[发明专利]一种有机/无机杂化双功能荧光纳米花及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种有机/无机杂化双功能荧光纳米花及其制备方法与应用。所述有机/无机杂化双功能荧光纳米花材料由蛋白包裹的荧光金纳米簇、小分子人工抗原和钙离子组装而成；具体可按照如下方法制备：配制蛋白包裹的荧光金纳米簇和小分子人工抗原的溶液；向溶液中加入氯化钙溶液并振荡混匀；将上述处理的所述溶液在避光的条件下进行静置反应即得。本发明制备方法操作简单、成本低廉、反应条件温和、绿色环保，所制备的有机/无机杂化双功能荧光纳米花可作为荧光检测探针用于免疫学检测领域；根据荧光金纳米簇上蛋白以及小分子人工抗原的不同，可以形成多种荧光检测探针用于检测不同的目标物分子，在多残留高通量检测等方面有着很高的推广应用价值。

技术领域

本发明涉及一种有机/无机杂化双功能荧光纳米花及其制备方法与应用，属于纳米材料领域以及生物学领域。

背景技术

荧光金纳米簇是近几年出现的一种新型荧光纳米材料，它是由几个到几百个原子组成的粒径为0.2～3nm的核壳型纳米材料，具有较强的光致发光、良好的光稳定性、大的斯托克斯位移和高的荧光量子产率，它已成功被用于过氧化氢、重金属离子、茶多酚等物质的检测。因为荧光金纳米簇的超小粒径和抗体/抗原等生物识别材料偶联效率不高且不易纯化，且相对量子点和有机染料来说，荧光强度较弱，所以将其作为荧光标记物用于免疫检测中的报道很少。

发明内容

本发明的目的是提供一种有机/无机杂化双功能荧光纳米花及其制备方法与应用，本发明提供的制备方法操作简单、成本低廉、反应条件温和、绿色环保；所制备的有机/无机杂化双功能荧光纳米花可作为荧光检测探针用于基于抗原抗体特异性识别的磁分离荧光免疫分析方法中。

本发明所提供的有机/无机杂化双功能荧光纳米花材料其由蛋白包裹的荧光金纳米簇、小分子人工抗原和钙离子组装而成；具体是以蛋白(如牛血清白蛋白)包裹的荧光金纳米簇(AuNCs@BSA)和小分子人工抗原为有机组分，与钙离子形成有机/无机杂化的具有三维花状纳米结构的双功能荧光纳米材料。

所述有机/无机杂化双功能荧光纳米花材料按照包括如下步骤的方法制备：

(1)配制蛋白包裹的荧光金纳米簇和小分子人工抗原的溶液；

(2)向所述溶液中加入氯化钙溶液并振荡混匀；

(3)将步骤(2)处理的所述溶液在避光的条件下进行静置反应，即得所述有机/无机杂化双功能荧光纳米花材料。

上述的制备方法中，步骤(1)中，采用磷酸盐缓冲液配饰所述溶液；

所述蛋白可为任何适合于作为小分子人工抗原中的载体蛋白的蛋白，如牛血清白蛋白；

所述小分子人工抗原可为克伦特罗人工抗原、喹乙醇人工抗原或诺氟沙星人工抗原；

根据检测目标物分子的不同，选择相应的蛋白和小分子人工抗原。

上述的制备方法中，步骤(1)中，所述蛋白包裹的荧光金纳米簇是按照包括如下步骤的方法制备的：

将所述蛋白和氯金酸混合进行反应(如37℃)，然后加入NaOH溶液(1M)调节pH至11～13(如12)，继续反应(如在37℃条件下搅拌反应12小时)即得，纯水透析后，收集并放于4℃保存备用；

所述蛋白的浓度可为50mg/mL，所述氯金酸的浓度可为10mM。

上述的制备方法中，步骤(1)中，所述磷酸盐缓冲液的浓度可为3～5mmol/L；

所述蛋白包裹的荧光金纳米簇与所述小分子人工抗原的质量投料比可为8～10：1，具体可为9：1；

所述溶液中蛋白的浓度可为0.2～0.5mg/mL，具体可为0.2mg/mL。