[发明专利]一种检测肌红蛋白免疫荧光定量试纸条

权利要求书

1.一种检测肌红蛋白免疫荧光定量试纸条，包括吸水垫、硝酸纤维素膜、质控线、检测线、结合垫、样品垫、PVC底板；其中，结合垫上喷有鼠源肌红蛋白单克隆抗体-荧光微球偶联物；检测线为鼠源肌红蛋白单克隆抗体，质控线为羊抗鼠IgG多克隆抗体，且检测线和质控线依次固定于硝酸纤维素膜上；样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫依次搭接并承载于PVC底板；其特征在于：鼠源肌红蛋白单克隆抗体-荧光微球偶联物使用储存液进行浸渍处理、保存和稀释；所述的储存液配方为：PB的质量浓度为15～50mM、BSA的百分浓度为1.6％～10％、Tween-80的百分浓度为0.4％～10％、葡萄糖的百分浓度为0.4％～10％、甘氨酸的百分浓度为1.5％～10％、PEG4000的百分浓度为0.8％～5％、PEG20000的百分浓度为1％～8％、Proclin300或叠氮钠的百分浓度为0.01％～1.5％，余量为水，pH为6.5～9.0。

2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于：所述的储存液配方为：PB的质量浓度为20～40mM、BSA的百分浓度为0.5％～4.8％、Tween-80的百分浓度为0.5～6.0％、葡萄糖的百分浓度为0.5～3.0％、甘氨酸的百分浓度为2.0～7.0％、PEG4000的百分浓度为1.0～3.0％、PEG20000的百分浓度为1.5～4.0％、Proclin300或叠氮钠的百分浓度为0.03～0.1％，余量为水，pH为7.0～8.0。

3.权利要求1～2任一项所述的试纸条的检测方法，其特征在于，将该试纸条加样层析后，检测质控线和检测线的荧光信号强度，并以质控线荧光信号强度校正检测线的荧光信号强度，实现肌红蛋白的定量检测。

4.一种检测肌红蛋白免疫荧光定量试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将荧光微球活化后与鼠源肌红蛋白单克隆抗体偶联，偶联完毕后加入封闭剂，保存于储存液中；

(2)将鼠源肌红蛋白-荧光微球偶联物用储存液稀释后，喷于结合垫上，干燥保存；

(3)将鼠源肌红蛋白单克隆抗体固定于硝酸纤维素膜上作为检测线，将羊抗鼠IgG多克隆抗体固定于硝酸纤维素膜上作为质控线；

(4)在PVC底板上依次搭接地粘贴：样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，并剪切成需要的宽度即成为荧光免疫层析试纸条；

所述的储存液配方为：PB的质量浓度为120～40mM、BSA的百分浓度为0.5％～4.8％、Tween-80的百分浓度为0.5～6.0％，葡萄糖的百分浓度为0.5～3.0％、甘氨酸的百分浓度为2.0～7.0％、PEG4000的百分浓度为1.0～3.0％、PEG20000的百分浓度为1.5～4.0％、Proclin300或叠氮钠的百分浓度为0.03～0.1％，余量为水，pH为7.0～8.0。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的储存液配方为：PB的质量浓度为20mM、BSA的百分浓度为1.8％、Tween-80的百分浓度为0.5％，葡萄糖的百分浓度为0.5％、甘氨酸的百分浓度为2％、PEG4000的百分浓度为1％、PEG20000的百分浓度为1.5％、Proclin300或叠氮钠的百分浓度为0.03％，余量为水，pH为7.5。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：鼠源肌红蛋白-荧光微球偶联物在储存液中的保存浓度为0.1～10mg/mL。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述样品垫的材质为玻璃纤维素膜或滤血膜。

8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述结合垫材质为玻璃纤维素膜。