[发明专利]一种简便有效的细菌疫苗纯化方法

权利要求书

1.一种简便有效的细菌疫苗纯化方法，其特征在于：

S1、生产荚膜多糖的细菌发酵液，培养至吸光度保持恒定并开始下降时，终止培养；

S2、用组氨酸缓冲液稀释发酵液OD₆₀₀至6.0以下，加裂解剂至终浓度为0.08~0.15%（w/v），控温14~17℃，持续搅拌24~48小时；所述组氨酸缓冲溶液由组氨酸、KCl、MgCl₂通过注射用水配制而成；且所述组氨酸缓冲溶液中组氨酸含量为90-120mmol/L，KCl含量为240-275mmol/L，MgCl₂含量为10mmol/L；

S3、将S2步骤处理后的发酵液调pH至2.0~3.0，然后静置沉淀；

S4、将S3步骤处理后的发酵液连续流离心，收集上清，再澄清过滤、超滤；

S5、加入活性炭、澄清过滤、超滤；

S6、用一定浓度的乙醇沉淀S5步骤所得超滤液，得多糖沉淀；

S7、离心S6步骤所得沉淀，用无水乙醇和丙酮洗糖、吹干，得精制荚膜多糖，-20℃保存。

2.一种根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S3中调pH以后，在常温下静置沉淀1~12小时。

3.一种根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S3中调pH以后，在2~8℃静置2~72小时。

4.一种根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S2中所述裂解剂为非动物源型溶解剂或动物源型溶解剂。

5.一种根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S2中所述裂解剂为脱氧胆酸钠。

6.一种根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S4中仅需要将调pH处理后的发酵液进行一次离心即可完成有效的固液分离。

7.一种根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S3中所用的调pH所用酸为乙酸、磷酸、盐酸和硫酸的任意一种。

8.一种根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S6中所述乙醇的浓度为80%。