[发明专利]一种乙酰基四肽-9的液相合成方法

权利要求书

1.一种乙酰基四肽-9的液相合成方法，其特征在于：

(1)合成Ac-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-OH

将H-Gln(Trt)-OH溶于NaOH水溶液中，在0～5℃下加入乙酸酐，反应生成Ac-Gln(Trt)-OH；

以四氢呋喃为溶剂，将Ac-Gln(Trt)-OH、1-羟基苯并三唑、N,N′-二环己基碳二亚胺在0～10℃下反应生成活泼酯，然后在有机碱催化下与H-Asp(OtBu)-OH反应，生成Ac-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-OH；

(2)合成H-Val-His(Trt)-OH

以四氢呋喃为溶剂，将Fmoc-Val-OH与N,N′-二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺在0～5℃下生成活泼酯，再与H-His(Trt)-OH、无机碱的水溶液反应生成Fmoc-Val-His(Trt)-OH；用哌啶-四氢呋喃脱除Fmoc-Val-His(Trt)-OH的Fmoc保护基，得到H-Val-His(Trt)-OH；

(3)合成Ac-Gln-Asp-Val-His-OH

以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂，将Ac-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-OH与1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑在-5～0℃下反应生成活泼酯，然后在有机碱催化下与H-Val-His(Trt)-OH反应，生成Ac-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Val-His(Trt)-OH；用切割液脱除Ac-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Val-His(Trt)-OH的所有侧链保护基，分离纯化，得到Ac-Gln-Asp-Val-His-OH，即乙酰基四肽-9。

2.根据权利要求1所述的乙酰基四肽-9的液相合成方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述H-Gln(Trt)-OH与乙酸酐、NaOH的摩尔比为1:1.1～1.5:2.0～3.0。

3.根据权利要求1所述的乙酰基四肽-9的液相合成方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述Ac-Gln(Trt)-OH、1-羟基苯并三唑、N,N′-二环己基碳二亚胺、H-Asp(OtBu)-OH、有机碱的摩尔比为1:1.1～1.5:1.3～1.6:1.0～1.3:3.0～4.0。

4.根据权利要求1所述的乙酰基四肽-9的液相合成方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述Fmoc-Val-OH、N-羟基丁二酰亚胺、N,N′-二环己基碳二亚胺、H-His(Trt)-OH、无机碱的摩尔比为1:1.1～1.3:1.3～1.5:1.1～1.3:2～4。

5.根据权利要求1所述的乙酰基四肽-9的液相合成方法，其特征在于：在步骤(3)中，所述Ac-Gln(trt)-Asp(OtBu)-OH、H-Val-His(Trt)-OH、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑、有机碱的摩尔比为1:1.1～1.5:1.0～1.5:1.5～2.5:3.0～5.0。

6.根据权利要求1所述的乙酰基四肽-9的液相合成方法，其特征在于：在步骤(3)中，所述的切割液是三氟乙酸与三异丙基硅烷、水的体积比为90:5:5的混合液。

7.根据权利要求1～6任意一项所述的乙酰基四肽-9的液相合成方法，其特征在于：所述的有机碱为N-甲基吗啉或N,N’-二异丙基乙胺。

8.根据权利要求1～6任意一项所述的乙酰基四肽-9的液相合成方法，其特征在于：所述的无机碱为碳酸氢钠或碳酸钠。