[发明专利]一种凝结芽孢杆菌及其发酵方法、凝结芽孢杆菌制剂的制备方法以及猪饲料

权利要求书

1.一种凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)WHQG1，其保藏编号为CCTCC NO：M2015321。

2.一种如权利要求1所述的凝结芽孢杆菌WHQG1的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：

将凝结芽孢杆菌WHQG1进行菌种培养，得到凝结芽孢杆菌种子液；

对发酵培养基进行预处理，制得浓缩发酵培养基；

将凝结芽孢杆菌种子液接种至浓缩发酵培养基中进行摇瓶发酵，接种量为1～10％，摇床转速130～150r/min，于38～42℃培养22～26h，获得发酵种子液；

将发酵种子液接入发酵罐中，接种量为1～10％，通气量为330～370L/h，搅拌速度为175～225r/min，pH值为6.4～6.6，于38～42℃培养36～42h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。

3.如权利要求2所述的凝结芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，对发酵培养基进行预处理，制得浓缩发酵培养基的步骤，具体包括：

将发酵培养基与水按照质量比1：2.5～1：3.5混合，煮沸25～35min，过滤后制得浓缩发酵培养基。

4.如权利要求2或3所述的凝结芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基包括以下质量浓度的组分：玉米粉5g/L、小麦麸皮10g/L、氯化铵7.5g/L、豆粕粉7.5g/L、氯化钠5g/L、MnSO₄·H₂O 0.3g/L和K₂HPO₄·3H₂O1g/L；所述发酵培养基的pH值为6.4～6.6，于118～124℃下灭菌18～22min后冷却至室温。

5.如权利要求2所述的凝结芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，将凝结芽孢杆菌WHQG1进行菌种培养，得到凝结芽孢杆菌种子液的步骤，具体包括：

将凝结芽孢杆菌WHQG1接种至液体培养基中，于35～39℃培养22～26h，得到活化菌株；

将活化菌株接种至固体平板培养基中，于35～39℃培养22～26h，得到纯化菌株；

挑选纯化菌株中的单一菌落，接种于液体培养基中，摇床转速130～150r/min，于38～42℃培养22～26h，获得凝结芽孢杆菌种子液。

6.如权利要求5所述的凝结芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，所述液体培养基包括以下质量浓度的组分：胰蛋白胨10g/L、牛肉浸出粉3g/L和氯化钠5g/L；所述液体培养基的pH值为6.4～6.6，于118～124℃下灭菌18～22min后冷却至室温。

7.如权利要求5所述的凝结芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，所述固体平板培养基包括以下质量浓度的组分：胰蛋白胨10g/L、牛肉浸出粉3g/L、氯化钠5g/L和琼脂15g/L；所述固体平板培养基的pH值为6.4～6.6，于118～124℃下灭菌18～22min后冷却至室温。

8.一种凝结芽孢杆菌制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将如权利要求2至7任意一项所述的凝结芽孢杆菌的发酵方法制备的凝结芽孢杆菌发酵液过滤后形成浓缩液；

用吸附剂与浓缩液进行混合吸附，得到凝结芽孢杆菌制剂。

9.一种猪饲料，其特征在于，包括如权利要求8所述的凝结芽孢杆菌制剂的制备方法制备的凝结芽孢杆菌制剂，所述凝结芽孢杆菌的含量为2.0×10⁷CFU/g。