[发明专利]一种海产品中邻苯二甲酸酯类环境激素的分散固相萃取-气相色谱-质谱检测方法

权利要求书

1.一种海产品中邻苯二甲酸酯类环境激素的分散固相萃取-气相色谱-质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）样品的采集和制样：将待检测的海产品进行前处理得到块体样品，用高速组织捣碎机匀质，得到待测样品，于-18℃冷冻保存，待测；

（2）取样和超声波萃取：称取2g上述待测样品，置于玻璃离心管中，加入10～20mL体积比为1:1的正己烷/二氯甲烷萃取剂，涡旋1～3min，以300～400W功率于30～40℃超声波提取10～20min；当样品中含硫化合物的背景干扰时，加入1～3g铜粉超声脱硫，3000～6000r/m高速离心3～5min，取上清液，得到正己烷/二氯甲烷提取液，所述正己烷/二氯甲烷提取液过无水硫酸钠柱；再向样品中加入10～20mL正己烷，重复上述过程，得到正己烷提取液；将所述正己烷/二氯甲烷提取液和正己烷提取液合并，得到混合提取液；

（3）浓缩：将步骤（2）得到的混合提取液，在水泵真空度0.08～0.09Mpa，水浴温度35～40℃，转速50～100rpm条件下，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入2mL正己烷溶解，得到正己烷溶解液；

（4）分散固相萃取净化：取150～250mg石墨化炭黑于试管中，加入步骤（3）得到的正己烷溶解液，涡旋30～60s，3000～6000r/m高速离心1～3min，取上清液a；再向上述石墨化炭黑中加入2mL丙酮，重复上述涡旋离心过程，取上清液b；再向上述石墨化炭黑中加入2mL二氯甲烷，重复上述涡旋离心过程，取上清液c；再向上述石墨化炭黑中加入2mL甲醇，重复上述涡旋离心过程，取上清液d；合并上清液a、b、c、d，得到混合上清液；

（5）浓缩定容：将步骤（4）得到的混合上清液在水浴温度40～50℃下，吹氮气蒸发至干，用正己烷溶解，并定容至1mL，作为上机溶液；

（6）气相色谱-质谱检测器检测：进样针抽取上述上机溶液，按照设定好的气相色谱-质谱条件进行检测；气相色谱柱选用HP-35MS毛细管气相色谱柱；气相色谱柱升温程序为：初始温度100℃，以10℃/min升温至290℃；保持5.0min，总运行时间24min；

（7）标准曲线绘制：以选择离子监测模式定性，外标法定量；

（8）回收率测定：将采集到的实际样品，按照上述步骤（1）～（6）的要求进行操作，并与上述步骤（7）得到的标准曲线比较，通过换算最终得到实际样品中16种邻苯二甲酸酯的含量；所述16种邻苯二甲酸酯为苯二甲酸二甲酯，邻苯二甲酸二乙酯，邻苯二甲酸二异丁酯，邻苯二甲酸二丁酯，邻苯二甲酸二-4-甲基-2-戊基酯，邻苯二甲酸二甲氧基乙酯，邻苯二甲酸二正戊酯，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯，邻苯二甲酸二己酯，邻苯二甲酸丁苄酯，邻苯二甲酸二-2-乙基己酯，邻苯二甲酸二丁氧基乙基酯，邻苯二甲酸二环己酯，邻苯二甲酸二正辛酯，邻苯二甲酸二苯酯和邻苯二甲酸二壬酯；

将不同加标浓度的加标样品，按照上述步骤（2）～（6）的要求分别进行五次平行操作，并与上述步骤（7）得到的标准曲线比较，通过换算最终得到加标样品中16种邻苯二甲酸酯的测定浓度；按照下式进行回收率计算：

；

式中：R——回收率，%；

C_s——加标样品中16种邻苯二甲酸酯的测定浓度，μg/kg；

C₀——实际样品中16种邻苯二甲酸酯的浓度，μg/kg；

C——加标样品中16种邻苯二甲酸酯的理论加标浓度，μg/kg；

所述加标样品为经步骤（1）预处理后的实际样品中加入邻苯二甲酸酯后的样品。

2.根据权利要求1所述的一种海产品中邻苯二甲酸酯类环境激素的分散固相萃取-气相色谱-质谱检测方法，其特征在于，步骤（1）中，所述待检测的海产品为鱼，虾，蟹和贝类中的一种。

3.根据权利要求2所述的一种海产品中邻苯二甲酸酯类环境激素的分散固相萃取-气相色谱-质谱检测方法，其特征在于，所述将待检测的海产品进行前处理的方法为：

鱼：去鳞、去皮，沿脊背取肌肉；

虾、蟹：去头、去壳、去附肢，取肌肉；

贝类：去壳，取可食部分；

将上述样品切块，得到块体样品，所述块体样品的体积不大于0.5 cm×0.5 cm×0.5cm。