[发明专利]一种解酒剂的制备方法

权利要求书

1.一种解酒剂的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：

（1）取泡菜汁接种到菌种液体培养基中，培养，得泡菜汁培养液，将泡菜汁培养液用质量分数为0.9%的生理盐水稀释10^-6的稀释级，将稀释后泡菜汁培养液涂布于菌种分离平板培养基中，培养，挑取产生溶钙圈最大的的单菌落平板划线2~3次后，得到初筛的乳酸菌菌株；

（2）将初筛的乳酸菌菌株接种至菌种液体培养基，活化培养，得培养物，将培养物接种于发酵培养基中，发酵，得发酵液，将发酵液置于沸水中加热，向加热的发酵液中加入无水乙醇，沉淀蛋白，旋转蒸发除去乙醇，得预处理后发酵液，将处理后发酵液过滤，取滤液，干燥，得产GABA乳酸菌菌株；

（3）将高活性酵母菌接种至活化种子培养基中，得酵母菌活化培养物，将酵母菌活化培养物接种至发酵发酵培养基中发酵，得发酵液，过滤，取滤液，干燥，得产GABA酵母菌菌株；

（4） 将蒜，大豆，葛根，芹菜，蜂蜜，葡萄，花旗参，水混合均匀，打浆，纱布过滤，去滤渣，离心，取上清液蒸煮，得解酒原料液，向解酒原料液中加入产GABA乳酸菌菌株、产GABA酵母菌菌菌株，发酵，得解酒发酵液，干燥，得解酒剂。

2.根据权利要求1所述的解酒剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中菌种提取原料为白菜、甘蓝、萝卜、青椒按质量比5:2:6:3混合均匀，得混合物，将混合物捣碎，打浆，过100目滤布过滤、调值至7.2±0.2，121℃灭菌20min，制得的泡菜汁与质量分数为5%食盐水体积比1:1混合，得混合液，将混合液倒入容器中，加盖水封，20~25℃发酵7~9天，得泡菜汁。

3.根据权利要求1所述的解酒剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中泡菜汁与菌种液体培养基的体积比为1:10，培养条件为30~35℃培养36~48h。

4.根据权利要求1所述的解酒剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中菌种分离平板培养基：按质量份数计，取CaCO₃15~20份、柠檬酸三铵1~2份、乙酸钠5~8份、胰蛋白胨11~13份、酵母膏6~9份、牛肉膏10~15份、葡萄糖18~20份、磷酸氢二钾0.03~0.05份、MnSO₄·4H₂O0.05~0.1份、吐温-801~2份、琼脂15~20份、MgSO₄·7H₂O 0.3~0.7份、蒸馏水1000份，调整pH至6.3，121℃灭菌30 min；菌种液体培养基：菌种分离平板培养基去掉琼脂和CaCO₃，其他组分不变。

5.根据权利要求1所述的解酒剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中乳酸菌菌株与菌种液体培养基的质量比为1:9，培养条件为30~35℃活化18~24 h，活化乳酸菌培养液按质量分数为2%的接种量接种于发酵培养基中，发酵条件为30~32℃发酵3~5d，发酵液与无水乙醇的体积比为1:3。

6.根据权利要求1所述的解酒剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中发酵培养基配方为按质量份数计，取胰蛋白胨11~13份、酵母膏6~9份、牛肉膏10~15份、葡萄糖18~20份、磷酸氢二钾0.03~0.05份、MnSO₄·4H₂O0.05~0.1份、吐温-80 1~2份、MgSO₄·7H₂O 0.3~0.7份、蒸馏水1000份，谷氨酸钠30~35份，121℃灭菌20 min。

7.根据权利要求1所述的解酒剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中GABA的定性分析：首先配制展开剂，准确量取一定体积的正丁醇、冰醋酸和去离子水，将其按照3:2:1 比例混合均匀，再向其加入质量分数为0.4%的茚三酮显色剂，以GABA标准溶液、培养基作对照，将发酵液8000r/min离心进行纸色谱层析，点样量5μL，展开后在85~90℃的烘箱中显色10 min后取出。

8.根据权利要求1所述的解酒剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中活化种子培养基的配方为按质量份数计，取脱脂乳粉15~20份，蛋白胨10~12份，葡萄糖4~7份，25%酵母浸出液7~9份，NaCl 0.4~0.8份，水1000份，113℃灭菌 20 min。