[发明专利]虾虹彩病毒(SIV)的RAA恒温荧光检测方法及试剂

权利要求书

1.一种虾虹彩病毒核酸的检测试剂盒，该试剂盒由下列组成：虾虹彩病毒正向引物、反向引物以及特异性荧光探针，其中所述虾虹彩病毒正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示、所述虾虹彩病毒反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3，其5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团；ABuffer、BBuffer、RAA干粉试剂、虾虹彩病毒标准品和ddH₂O；所述A Buffer为20% PEG ；B Buffer为280mMMgAc；所述的RAA干粉试剂的成分如下：1mmol/LdNTP、90ng/μL SSB蛋白、120ng/μLrecA重组酶蛋白或30ng/μL Rad51、30ng/μL Bsu DNA聚合酶，100mmol/L Tricine、20%PEG、5mmol/L 二硫苏糖醇、100ng/μL肌酸激酶、Exo核酸外切酶；虾虹彩病毒标准品为含有虾虹彩病毒保守区基因部分序列的阳性质粒；所述含有虾虹彩病毒保守区基因部分序列的阳性质粒的序列如SEQ ID NO.4所示。

2.以非疾病诊断为目的的虾虹彩病毒的RAA恒温荧光检测方法，提取待测样品的DNA，以待测样品的DNA为模板，利用权利要求1提供的检测试剂盒，在虾虹彩病毒的正向引物、反向引物、特异性荧光探针及RAA干粉试剂、A Buffer、B Buffer和ddH₂O存在下进行实时荧光RAA反应，根据实时荧光RAA扩增曲线分析待测样品；其中所述虾虹彩病毒正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1 所示、所述虾虹彩病毒反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2 所示，所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3，其5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。