[发明专利]具有胁迫耐受性的简单节杆菌突变菌株及工程菌

权利要求书

1.一株具有胁迫耐受性的简单节杆菌突变菌株，其特征在于，所述突变株具体为简单节杆菌(Arthrobacter simplex)TCCC11307-UV15X1-2，保藏编号CGMCC No.14539。

2.一株具有胁迫耐受性的简单节杆菌基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以简单节杆菌CGMCC No.14539为宿主细胞，过表达序列表SEQ ID No.8-14任一所示的抗逆蛋白所得。

3.如权利要求2所述的一株具有胁迫耐受性的简单节杆菌基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以pART2质粒为表达载体，pART2质粒的GenBanK登录号为：DQ191047。

4.如权利要求2所述的一株具有胁迫耐受性的简单节杆菌基因工程菌，其特征在于，SEQ ID No.8对应的抗逆蛋白为GroEL，其编码基因groEL的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；SEQ ID No.9对应的抗逆蛋白为DnaK，其编码基因dnaK的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；SEQ ID No.10对应的抗逆蛋白为RecA，其编码基因recA的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；SEQ ID No.11对应的抗逆蛋白为UvrD，其编码基因uvrD的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；SEQ ID No.12对应的抗逆蛋白为KatG，其编码基因katG的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；SEQ ID No.13对应的抗逆蛋白为SOD，其编码基因sod的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；SEQ ID No.14对应的抗逆蛋白为TreS，其编码基因treS的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示。

5.权利要求2所述的一株具有胁迫耐受性的简单节杆菌基因工程菌的构建方法，具体如下：

(1)以突变株TCCC11307-UV15X1-2基因组为模板，PCR扩增得到该菌株中的groEL，dnaK，recA，uvrD，katG，sod，treS基因；

(2)利用基因工程的手段将上述基因分别连接到大肠杆菌-节杆菌穿梭质粒pART2的启动子后，转化到大肠杆菌DH5α中进行复制；

(3)提取重组质粒，分别电转化到简单节杆菌突变株TCCC11307-UV15X1-2中进行过表达。

6.权利要求1所述简单节杆菌(Arthrobacter simplex)TCCC11307-UV15X1-2在催化醋酸可的松发生C1，2位脱氢反应中的应用。

7.权利要求2所述具有胁迫耐受性的简单节杆菌基因工程菌在催化醋酸可的松发生C1，2位脱氢反应中的应用。

8.如权利要求7所述的具有胁迫耐受性的简单节杆菌基因工程菌的应用，其特征在于，转化体系中的乙醇浓度为8-10％。

9.如权利要求7所述的具有胁迫耐受性的简单节杆菌基因工程菌的应用，其特征在于，转化体系中底物醋酸可的松的浓度为6-8g/L。