[发明专利]一种雷帕霉素的提取方法

权利要求书

1.一种雷帕霉素的提取方法，其特征在于，包括：

将雷帕霉素发酵液调pH值至4.8-5.5，过滤，得滤饼；

加入第一有机溶剂萃取，过滤，得滤液，浓缩回收第一有机溶剂，得第一浓缩物；所述第一有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、二甲基亚砜、苯甲醇中的一种或多种；以g/mL计，所述滤饼与所述第一有机溶剂的重量体积比为1：(1.5-10)；

加入第二有机溶剂萃取，降温，加入碳酸氢钠溶液，搅拌洗涤，静置分层；加入醋酸铵缓冲溶液，搅拌洗涤，静置分层，浓缩回收第二有机溶剂，得第二浓缩物；所述第二有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、丁醇、异丁醇、乙酸乙酯、丙酸甲酯、丙酸乙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯中的一种或多种；以g/mL计，所述滤饼与所述第二有机溶剂的重量体积比为1：(0.6-10)；以g/mL计，所述滤饼与所述碳酸氢钠溶液的重量体积比为1：(0.2-5)；所述碳酸氢钠溶液的质量分数为3％；

加入L-乳酸甲酯，搅拌溶解，过滤；降温至-15～10℃，搅拌下滴加第三有机溶剂，结晶，过滤，洗涤，减压烘干，得雷帕霉素；所述第三有机溶剂选自甲丁醚、甲戊醚、乙醚、乙丙醚、乙丁醚、丙醚、丙丁醚、丁醚、戊烷、己烷、庚烷、环己烷、环庚烷、甲基环戊烷、乙基环戊烷、甲基环己烷、乙基环己烷中的一种或多种；所述L-乳酸甲酯与所述第三有机溶剂的体积比为1：(1-5)；以g/mL计，所述滤饼与所述L-乳酸甲酯的重量体积比为1：(0.1-3)。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述滤饼与所述第一有机溶剂的重量体积比为1：(2.0-5.5)；和/或，

以g/mL计，所述滤饼与所述第二有机溶剂的重量体积比为1：(1.0-5.0)；和/或，

所述L-乳酸甲酯与所述第三有机溶剂的体积比为1：(2-4)。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所用pH值调节剂选自盐酸、硫酸、磷酸、醋酸、草酸中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述滤饼与所述碳酸氢钠溶液的重量体积比为1：(0.5-3)。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述滤饼与所述醋酸铵缓冲溶液的重量体积比为1：(0.2-5)；所述醋酸铵缓冲溶液的质量分数为3％，pH值为4.7-5.8。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述滤饼与所述醋酸铵缓冲溶液的重量体积比为1：(0.5-3)；所述醋酸铵缓冲溶液的pH值为4.8-5.5。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述滤饼与所述L-乳酸甲酯的重量体积比为1：(0.15-1.0)。

8.根据权利要1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将雷帕霉素发酵液调pH值4.4-6.0，过滤，得滤饼；加入第一有机溶剂进行萃取，过滤，得滤液；浓缩回收第一有机溶剂，得第一浓缩物；以g/mL计，所述滤饼与所述第一有机溶剂的重量体积比为1：(1.5-10)；

2)向上述所得第一浓缩物中加入第二有机溶剂萃取，降温至0-10℃，加入0-10℃的3％的碳酸氢钠溶液，搅拌洗涤，静置分层；加入pH值4.7-5.8的3％醋酸铵缓冲溶液，搅拌洗涤，静置分层，浓缩回收第二有机溶剂，得第二浓缩物；

以g/mL计，所述滤饼与所述第二有机溶剂的重量体积比为1：(0.6-10)，

以g/mL计，所述滤饼与所述碳酸氢钠溶液的重量体积比1：(0.2-5)，

以g/mL计，所述滤饼与所述醋酸铵缓冲溶液的重量体积比1：(0.2-5)；

3)上述所得第二浓缩物中，加入L-乳酸甲酯，搅拌溶解，过滤；滤液降温至-15～10℃，搅拌下滴加第三有机溶剂，结晶，过滤，洗涤，减压烘干，得雷帕霉素；

以g/mL计，所述滤饼与所述L-乳酸甲酯的重量体积比1：(0.1-3)，

所述L-乳酸甲酯与所述第三有机溶剂的体积比为1：(1-5)。