[发明专利]一种蛹虫草发酵转化女贞子中橄榄苦苷生成橄榄苦苷苷元的方法

说明书

技术领域

本发明是一种蛹虫草发酵转化女贞子中橄榄苦苷生成橄榄苦苷苷元的方法。

背景技术

蛹虫草又名北冬虫夏草、北虫草等，为麦角菌科虫草属真菌，是由子座(草部分)和菌核(虫的尸体部分)两部分组成的复合体。蛹虫草中含有大量的核苷类化合物、多糖类、虫草酸、蛋白质、甾醇类化合物以及过氧化歧化酶等成分，其中，所含有的虫草素是其最具有特色的成分，是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素，具有明显的抗肿瘤、抗衰老、提高免疫力、抑菌抗炎等功效。

橄榄苦苷是一种裂环烯醚萜苷类多酚化合物，广泛存在于各种木犀科的木犀榄属、女贞属、丁香属等植物中。近年来，橄榄苦苷的药理活性如抗氧化、抗炎、抗癌、抗肿瘤、抗菌、抗病毒和降血糖等逐渐被研究人员所发现，并逐渐应用于医药、保健食品、化妆品等行业，且应用前景广阔。

橄榄苦苷苷元是由橄榄苦苷去糖基化后得到的，经研究发现，橄榄苦苷苷元具有良好的抗老年痴呆、抗乳腺癌、抗炎、治疗糖尿病、抗氧化及降血脂的功效。一般情况下，苷元主要是通过酶水解、酸水解等方式得到，但具有酶制品成本高，酸水解后会使产品色泽、口感变差等不足之处，而利用微生物发酵的方法转化制备橄榄苦苷苷元可避免上述缺点。

因此，有必要探究一种新的转化橄榄苦苷生成橄榄苦苷苷元的方法，以满足需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蛹虫草发酵转化女贞子中橄榄苦苷生成苷元的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种蛹虫草发酵转化女贞子中橄榄苦苷生成苷元的方法，包括以下步骤：

S1，蛹虫草种子液的制备

取蛹虫草菌丝块接种于PDA培养基中，放置在恒温培养箱中，进行蛹虫草菌种活化；

将活化后的蛹虫草菌种接种于种子液培养基中，得到蛹虫草种子液；

S2，蛹虫草种子液的发酵转化

取干燥好的女贞子，将其粉碎后过60目筛，将筛选后的女贞子加入配料制成发酵培养基；

将蛹虫草种子液接种于灭菌后的发酵培养基中，静置培养，经过发酵后将橄榄苦苷转化为橄榄苦苷苷元。

作为本发明再进一步的方案：步骤S1中，活化后的蛹虫草菌种接种在种子液培养基后，在25℃的温度条件下，以130r·min^-1的转速在回旋式振荡器上恒温培养5天，即可得到蛹虫草种子液。

作为本发明再进一步的方案：步骤S1中，恒温培养箱的温度为25℃，培养时间为6天。

作为本发明再进一步的方案：步骤S1中，PDA培养基的组成成分为：马铃薯200g·L^-1，葡萄糖25g·L^-1，琼脂15g·L^-1，PH状态为自然。

作为本发明再进一步的方案：步骤S1中，种子液培养基的组成成分为：葡萄糖25g·L^-1，酵母膏15g·L^-1、KH₂PO₄1g·L^-1、MgSO₄1g·L^-1和VB₁0.05g·L^-1，PH状态为自然。

作为本发明再进一步的方案：步骤S2中发酵培养基的制作方法是：称取粉碎后的女贞子置于三角瓶中，加入水、KH₂PO₄、MgSO₄和VB₁，密封后于121℃下高压蒸汽灭菌30min，作为发酵培养基。

作为本发明再进一步的方案：女贞子、水、KH₂PO₄、MgSO₄和VB₁的用量为女贞子20g、水100g、KH₂PO₄0.5g、MgSO₄0.5g、VB₁0.01g。

作为本发明再进一步的方案：步骤S2中，静置培养的温度为25℃，时间为15天。

一种橄榄苦苷及其苷元含量的检测方法，包括以下步骤：

(1)橄榄苦苷对照品溶液的制备：精密称取橄榄苦苷对照品，加入适量甲醇使其溶解，配制成浓度0.2、0.35、0.4、0.8、1mg·mL^-1的对照品溶液；