[发明专利]一种检测禽蛋中氟虫腈及其代谢物的方法

权利要求书

1.一种检测禽蛋中氟虫腈及其代谢物氟甲腈、氟虫腈硫醚和氟虫腈砜的方法，其特征在于，所述的方法包括有如下的步骤：

1)待检测样品的制备

将待检测禽蛋的蛋壳敲碎，内容物粉碎后作为待测样品；

2)提取液的制备

将待测样品加入到萃取缓冲液中，进行震荡提取后；提取液中加入无水乙醇进行杂质的沉淀，然后离心获得上清液；将上清液倾移入到鸡心瓶中，以水浴减压旋转蒸发方式去除乙醇；旋转蒸发结束后，将水溶液转移到离心管中，用乙腈润洗鸡心瓶合并入离心管中，加入硫酸镁和乙酸钠进行震荡处理后，再加入过量氯化钠，震荡，以使水组分饱和，离心后吸取上清液加入到含有硫酸镁和PSA的纯化管中，旋涡震荡后，再次进行离心操作，转移上层溶液于已加入无水硫酸钠的离心管中进行震荡脱水，然后将样液再经0.22μm有机相针式滤膜过滤，获得检测液供气相色谱-质谱分析用；

3)气相色谱-质谱分析

使用HP—5MS毛细管色谱柱，进样口温度：280℃；不分流模式；载气：He；恒压模式；进样量1.0μL；柱箱温度：初始80℃维持1min，程序升温20℃/min至200℃，维持4min；继续程序升温20℃/min至280℃，再次程序升温10℃/min至310℃，维持2min；离子源温度：300℃；电离电压：70ev；四级杆温度：180℃；辅助通道温度：280℃；发射电压：1500ev；扫描方式：多反应离子监测模式MRM；溶剂延迟：5min；监测离子确定与氟虫腈及其代谢物的保留时间；

通过试样色谱图的保留时间与标准溶液的保留时间、色谱峰的特征离子与相应浓度标准品各色谱峰的特征离子相对照定性判断；

试样溶液中的离子相对丰度与基质匹配标准溶液中的离子相对丰度相比，根据定量离子进行外标法，通过从标准曲线确定的公式进行定量判断；

所述的步骤2)中的萃取缓冲液为无水乙醇、洗涤缓冲液和氨水的混合溶液，其中无水乙醇、洗涤缓冲液和氨水的体积比为10:10:1；

所述的洗涤缓冲液的组成及配比如下：0.004moL/L的二水合磷酸二氢钠、0.016moL/L的十二水合磷酸氢二钠、0.15moL/L的氯化钠，0.1％吐温20。

2.如权利要求1所述方法，其特征在于，所述的公式，其建立的方法如下：

1)标准曲线制作

用丙酮稀释氟虫腈及其代谢物标准品制成标准混合溶液，将标准混合溶液加在空白蛋类试样中制成具有不同标准浓度点的工作曲线；标准品与待测样品一样，按照权利要求1所述的步骤1-3的顺序进行检测；

2)计算公式与数据处理

以氟虫腈及其代谢物标准溶液各浓度点的响应值进行曲线回归，作为定量标准，根据样品响应值自动计算出样液的农药浓度，再将计算结果转换成质量分数，氟虫腈残留量为氟虫腈及其代谢物残留之和，以氟虫腈表示,以W计，单位以毫克每千克表示，其计算公式为：

W＝ρ×V/(m×1000)

其中ρ-根据标准曲线回归，得到的被测样液的浓度ng/mL；

m-试样的质量g、

V-定容体积mL。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤2)中所述的离心，是以4000r/min离心5min。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤2)中硫酸镁和乙酸钠的质量比为4:1。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的氟虫腈及其代谢物标准溶液的浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，40ng/mL，60ng/mL，80ng/mL，100ng/mL。