[发明专利]一种地加瑞克的纯化方法

说明书

本发明属于医药技术领域，涉及一种地加瑞克的纯化方法，具体涉及一种碱性酸式盐溶液或弱碱溶液加入到含三氟乙酸的地加瑞克的醇类和水的混合溶剂中搅拌反应，过滤、打浆、洗涤及干燥，以去除地加瑞克中三氟乙酸的方法，该方法环保价廉、操作简便、耗时短且工艺稳定，适于工业上大规模应用。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种地加瑞克的纯化方法，具体而言涉及一种碱性酸式盐或弱碱去除地加瑞克中三氟乙酸的方法。

背景技术

三氟乙酸(Trifluoroacetic acid，TFA)是多肽固相合成中Fmoc(9-芴甲氧羰基)保护策略中常用的裂解试剂，也是多肽纯化过程中流动相中常用的离子对试剂。三氟乙酸的酸性较强，一般与多肽结合成盐存在。但如果是用于临床前和临床研究中的多肽，残留的三氟乙酸或氟化物对人体是有毒的，必须通过脱盐或转化成醋酸盐去除。

地加瑞克(Degarelix)是由Ferring Pharmaceuticals公司开发(Trade Name:Firmagon)的一种含有7个非天然氨基酸的线性十肽，用于治疗晚期前列腺癌。地加瑞克的合成工艺主要为固相合成方法，固相合成的树脂肽通过三氟乙酸裂解得到粗肽。目前文献报道固相合成多肽纯化多采用反相色谱，离子交换色谱等色谱方法，CN102428097A、CN102329373A以及CN103992378均采用Fomc策略合成地加瑞克，经三氟乙酸裂解后得到的多肽粗品溶于水后，进行了两次C₁₈柱纯化和一次C₁₈柱脱盐以除去三氟乙酸。由于裂解过程中三氟乙酸用量大，粗肽中三氟乙酸含量较高，其水溶液酸性较强，反相C₁₈柱纯化过程中，对填料损害大，降低填料寿命和柱效，影响纯化工艺的稳定性。同时，柱层析纯化需要用到大量含乙腈等有毒试剂作为流动相，处理耗时长，需要三次柱层析才能去除肽类杂质，不适于企业大规模生产，更会造成原料和试剂的浪费，若采用向含三氟乙酸的地加瑞克的水溶液中加碱沉淀地加瑞克，易导致体系形成果冻状物，无法过滤，这使其无法在工业上大规模应用，因此，如何获得一种操作简便、成本低廉、绿色环保的除去三氟乙酸的方法成为亟待解决的问题。

发明内容

本发明提供了一种地加瑞克的纯化方法，包括：

(1)含有三氟乙酸的地加瑞克在碱性酸式盐或弱碱的存在下，在醇类溶剂和水的混合溶剂中进行反应；

(2)分离固体。

在一些实施方案中，所述含有三氟乙酸的地加瑞克中三氟乙酸的质量分数为0.5％～60％，优选为5％～50％，更优选为10％～30％，进一步优选为15％～25％，最优选为18％～20％；在本申请的一些具体实施方案中，所述含有三氟乙酸的地加瑞克中三氟乙酸的质量分数为19.9％。

在一些实施方案中，所述步骤(1)的碱性酸式盐为碱金属类碱性酸式盐，可选自碱金属类碳酸盐、碱金属类碳酸氢盐、碱金属类磷酸盐或碱金属类磷酸氢盐的一种或一种以上，优选为碱金属类碳酸盐或碳酸氢盐的一种或两种，更优选为碱金属类碳酸氢盐。所述碱金属选自锂、钠或钾，优选为钠或钾，更优选为钠。

在一些实施方案中，所述步骤(1)的碱性酸式盐选自碳酸钠、碳酸氢钠或磷酸氢二钠的一种或一种以上，优选为碳酸钠或碳酸氢钠的一种或两种，更优地为碳酸氢钠。

在一些实施方案中，所述步骤(1)的弱碱选自三乙胺或氨的一种或两种。

在一些实施方案中，所述步骤(1)的醇类溶剂选自甲醇、乙醇或异丙醇中的一种或一种以上，优选为甲醇或乙醇的一种或两种，更优地为甲醇。

在一些实施方案中，所述步骤(1)的醇类溶剂和水体积比为2.5～30:1，优选为3～25:1，更优选为4～15:1，最优选为5～10:1。