[发明专利]一种透明质酸寡糖修饰的胶原蛋白纳米纤维血管修复材料及其制备方法

权利要求书

1.一种透明质酸寡糖修饰的胶原蛋白纳米纤维血管修复材料的制备方法，包括步骤如下：

(1)透明质酸寡糖修饰的胶原蛋白的制备：通过氰基硼氢化钠还原透明质酸寡糖醛基与胶原蛋白上自由氨基缩合形成终产物席夫碱，在30～40℃条件下磁力搅拌20～30h得到反应液，除去反应液中未反应的透明质酸寡糖，得到透明质酸寡糖修饰的胶原蛋白；

所述的缩合反应溶剂为体积比3:2的六氟异丙醇和0.1mol/L NaHCO₃溶液的混合体系，共5mL，pH 7.0；

(2)糖基化胶原蛋白的纤维成型：利用静电纺丝工艺，将步骤(1)得到的透明质酸寡糖修饰的胶原蛋白溶入有机溶剂中，磁力搅拌制备纺丝液，然后在15～25kV的高压电场下，调节纺丝液的给液速度为1.0～2.0mL/h，纺丝液总体积为0.5～1.5mL，静电纺丝制备三维多孔纳米纤维膜材料，并采用质量体积百分比浓度为20～30％的戊二醛水溶液熏蒸交联40～60h；

其中，透明质酸寡糖的分子量范围为776～3000Da，偶联得到透明质酸寡糖修饰的胶原蛋白中透明质酸寡糖的质量百分比为1.44％～2.66％。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的磁力搅拌反应条件为37℃反应24h。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述除去反应液中未反应的透明质酸寡糖的方法为：将反应液与体积百分比浓度为5％的乙酸溶液按体积比1∶2 的比例混合，选择截留分子量为30kDa的超滤管，转速3500～4000r/min超滤离心20～30min，再用体积百分比浓度为5％的乙酸重悬，按以上步骤再进行超滤4～6次。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的有机溶剂为质量体积百分比浓度8％的六氟异丙醇溶液，单位g/mL。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的静电纺丝条件为在20kV的高压电场下，调节纺丝液的给液速度为1.5mL/h，纺丝液总体积为0.9mL，纺丝距离为90mm，纺丝用铝箔覆盖硬纸板尺寸为10cm×10cm。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的纺丝纤维膜熏蒸采用质量体积百分比浓度为25％的戊二醛水溶液，熏蒸交联48h。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的熏蒸方法为：将质量体积百分比浓度为25％的戊二醛水溶液盛放在直径10cm的培养皿中，置于直径21cm的干燥器底部，将透明质酸寡糖-胶原蛋白静电纺丝纤维膜置于干燥器的干燥盘上。

8.权利要求1所述的纤维膜材料在制备血管修复支架材料中的应用。