[发明专利]一种七元内酯并呋喃衍生物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种七元内酯并呋喃衍生物及其制备和应用，特点是该七元内酯并呋喃衍生物的结构式如Ⅰ所示，其制备方法步骤包括通过保藏号为CGMCC No:12969的海洋木霉菌发酵培养来获取含新七元内酯并呋喃衍生物的发酵液，然后将发酵液用乙酸乙酯萃取，得粗浸膏，将该粗浸膏经减压硅胶柱层析和反相半制备高效液相色谱分离纯化得到，该七元内酯并呋喃衍生物具有抗白色念珠菌作用，优点是可以作为白色念珠菌抑制剂的新药物成分或先导化合物。

技术领域

本发明涉及一种七元内酯并呋喃衍生物，尤其是涉及一种用海洋木霉菌制备七元内酯并呋喃衍生物的方法以及该类化合物在制备白色念珠菌抑制剂的应用。

背景技术

白色念珠菌( Candida albicans)是寄居在正常人体消化道、呼吸道和女性生殖道黏膜上的正常菌群，也是念珠菌属中最常见的一种条件致病菌。近年来，由于免疫抑制剂的大量应用，肿瘤放疗、化疗，侵入性治疗，器官移植的开展，以及大量广谱抗生素的广泛应用导致正常菌群失调，使得白色念珠菌的感染率和发病率较以往有明显的增加。由于现有的抗真菌药物较少且具有较强的毒副反应，耐药菌株不断出现，加之生物膜相关感染的发生，使得寻找新的抗真菌药物成为微生物学领域的一个研究热点。海洋微生物是一个有潜力的抗真菌化合物来源，是近年来的研究热点，且易培养，发酵周期短等优点。本发明人研究得知，海洋木霉菌Trichodermasp.（保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC No: 12969）的液体发酵的乙酸乙酯提取物有较好的抗白色念珠菌活性，遂对其活性成分进行了研究。目前尚未见该化合物的化学结构及抗白色念珠菌活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种具有抗白色念珠菌活性的七元内酯并呋喃衍生物及其制备方法和应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种七元内酯并呋喃衍生物，该七元内酯并呋喃衍生物的结构式如Ⅰ所示：

（I）。

上述七元内酯并呋喃衍生物的制备方法，具体包括如下步骤：

（1）发酵生产

将保藏号为CGMCC No: 12969的木霉菌Trichodermasp.划线复活，转接到PDB培养基中，于25℃、180 r/min培养4天，获得种子培养液；然后按体积百分数10%的接种量将种子液接种到PDB培养基中，于25℃，150rpm，摇床发酵14天，获得发酵液；

（2）浸膏的获得

将上述发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取3次，将萃取液减压浓缩除去乙酸乙酯，获得粗浸膏；

（3）化合物的分离精制

将上述粗浸膏用二氯甲烷和甲醇混合溶剂溶解后，加200-300目硅胶拌样，采用石油醚/乙酸乙酯以体积比15:1梯度为洗脱剂进行洗脱，对粗浸膏进行减压硅胶柱层析，收集洗脱组分，再经过半制备反相高效液相色谱进行分离纯化得到七元内酯并呋喃衍生物，其结构如式I所示：

（I）。

所述的PDB培养基的配制方法如下：将马铃薯提取物2g和葡萄糖8g，溶于400 mL海水中配制而成。

所述的二氯甲烷和甲醇混合溶剂中二氯甲烷与甲醇的体积比为1：1。

所述的半制备反相高效液相色谱的洗脱液为乙腈与水按体积比20:80的比例混合。

上述七元内酯并呋喃衍生物的应用，所述的七元内酯并呋喃衍生物在制备白色念珠菌抑制剂方面的应用。