[发明专利]葛根芩连片中金胺O含量测定的HPLC方法

说明书

本发明公开了葛根芩连片中金胺O含量测定的HPLC方法，包括以下步骤：（1）对照品溶液的制备；（2）样品溶液的制备；（3）进行液相色谱分析；（4）计算，得出结果。该法具有操作简便快速、准确度高、精密度高、稳定性好的优点，适用于实验室对于葛根芩连片的质量控制，检测葛根芩连片是否经过染色剂金胺O的染色，并准确测定出其含量，此法可批量进行检测，检测效率高。

技术领域

本发明涉及药品检测领域，具体是葛根芩连片中金胺O含量测定的HPLC方法。

背景技术

葛根芩连片，中成药名。为清热剂，具有解肌清热，止泻止痢之功效，主治泄泻痢疾，身热烦渴，下痢臭秽；菌痢、肠炎。《中国药典》2010年版中，葛根芩连片的处方为：葛根1000g，黄芩375g，黄连 375g，炙甘草 250g。

中药材和中药饮片生产是中成药生产经营使用的源头，在中药材和中药饮片中染色掺假会对后续的中药生产、临床配方带来严重危害。随着中医中药的普及和中药制剂的发展，市场对中药材和中药饮片的需求日益增加，价格上涨。在经济利益的驱使下，掺假造假的现象时有发生，染色掺假是常见作假手段。据报道用于黄连、黄芩染色的染料就有十多种，多为有害化工染料及其他化工物质，对人体的健康造成严重影响，其中染色剂金胺O掺假的情况最为严重。

金胺O，别名盐酸氨基四甲基二氨基苯甲烷、盐基淡黄、金丝雀黄、奥黄、碱性槐黄、碱性嫩黄O。黄色均匀粉状物，溶于冷水，易溶于热水呈亮黄色，溶于乙醇呈黄色，其水溶液温度超过70℃时会分解为四甲基苯甲酮，其水溶液加入浓硫酸呈无色，稀释后呈淡黄色。主要用于麻、纸、皮革、草编织品、人造丝等的染色，也用于印染棉织品。其色淀用于制墙纸、色纸、油墨和油漆等。金胺O是一种化工色素，对人体具有一定的毒性作用，国际癌症研究所（IARC）将其列为人类致癌化合物。金胺O对人体皮肤黏膜有轻度的刺激作用，可引起结膜炎、皮炎和上呼吸道刺激等症状，若长期过量使用，可对人体肝脏、肾脏等造成损害，甚至会致癌，我国卫生部于2008年将其列为非食用物质。为了进一步控制葛根芩连片的产品质量，保障公众的用药安全，本发明用高效液相色谱法对葛根芩连片中的金胺O染料进行含量测定。

目前公开文献中也有关于染色剂的检测方法，还没有关于葛根芩连片中金胺O的含量测定的相关技术。 下面是检测到的相关文献：

1、中国专利：一种染料检测方法；申请号：200910241427.X；申请日： 2009-12-01；申请人：中国检验检疫科学研究院；摘要：一种染料检测方法,该方法包括:对待测样品进行液相色谱和质谱检测,得到样品中各个组分的保留时间、特征碎片离子峰及特征碎片离子峰的面积;以及将各个组分的保留时间和特征碎片离子峰与染料标准品的保留时间和特征碎片离子峰进行比对,从而确定样品中含有的染料的种类,并根据特征碎片离子峰面积与浓度之间的线性方程,确定所述样品中含有的染料的含量。所述染料包括酸性红26、碱性红9、分散蓝1、酸性紫49、分散蓝3、溶剂黄1、分散蓝106、分散橙3、分散黄3、碱性紫1、碱性紫3、分散红1、溶剂黄3、分散蓝124、溶剂黄2和分散橙37中的一种或多种。本发明提供的染料检测方法可在9分钟内完成上述17种染料的分离检测。

2、中国专利：金胺O快速检测试剂盒、检测方法及在检测中药材的应用；申请号：201710119182.8；申请日：2017-03-02；申请人：广州安诺食品科学技术有限公司；摘要：本发明提供了一种金胺O快速检测试剂盒、检测方法及在检测中药材的应用，该试剂盒包含提取液、薄层板、点样管，以及离心管、吸管、西林瓶、取样勺、水、乙醇或甲醇等配件和配液；所述提取液为水、乙醇、甲醇等极性溶剂的一种或几种；本发明的检测方法操作简单，方便，不需要精密或大型仪器，检测时间短，一般4～6分钟内即可完成检测，而且检测结果直观通过看颜色变化就可以进行判断，非常适合从大批样品中挑选出少量的可疑样品，大大简化了检测的步骤，而只需要少量可疑的样品再进行质谱、色谱等精密检测，这也使检测成本大大降低，非常适合监管部门快速筛查的需要，对提高监管部门的运作效率、快速打击不法分子有着重大的社会效益。