[发明专利]沙牛的薄层色谱鉴别方法

说明书

本发明公开了一种沙牛的薄层色谱鉴别方法，该方法先考察样品的适用性、测定沙牛总氮含量，再进行沙牛胆固醇和氨基酸的薄层色谱鉴别。本发明操作方便、设备简单、显色容易，同时展开速率快，规范了沙牛的鉴别方法。

技术领域

本发明涉及中医药鉴别技术领域，具体是沙牛的薄层色谱鉴别方法。

背景技术

《中国药材标准名录》中沙牛的来源为蚁蛉科动物蚁狮MyrmeLeon formicarius L．、中华东蚁蛉EuroLon sinicus (Navas)．或黄足蚁蛉Hagenomyia micans (MacLaehLan)的幼虫干燥体。秋季捕捉，用沸水烫死，干燥即得。

蚁蛉科是脉翅目中种类最多、分布最广的一类药用昆虫，在全国各地均有分布。自古以来，民间常用沙牛治疗癫痫、疟疾、中耳炎、小儿高烧惊厥以及跌打损伤和毒蛇咬伤等症；近年来更发现用沙牛作主要成分，能有效治疗脉管炎和骨髓炎；在1983《中国药用动物志》中介绍其医疗作用为平肝熄风、解热镇痉、祛淤散结、拔毒消肿、通便泻下和截疟杀虫等。盛展能在1994《本草抗癌治验》记载其性辛、咸和凉，有毒，归脾和胃经，具败毒抗癌作用，用于胃癌和皮肤癌，有消肿解热之功效，也可治疠疮肿烂、无名肿毒、弹入伤肿和折伤跌肿。地牯牛有软坚化石利尿通淋有良好的溶石、化石、排石的作用，在粤北的仁化、乐昌和南雄等县、市的中医师以沙牛治疗秘尿系统结石有显著疗效。据不完全统计,近几年来治疗35例肾结石、27例膀胱结石、26例输尿管结石，有效率达100%，治愈率高达94.4%。沙牛有高效的“化石”功能， 对治疗结石疾病有极其显著的疗效。在广西民间及中成药也将沙牛用于通淋利湿，化石止痛，如五淋化石丸。沙牛具有较高的药用价值，也是五淋化石丸的主要成分，但是至今还未见有关于沙牛的鉴别方法报道。

发明内容

基于此，本发明公开了一种沙牛的薄层色谱鉴别方法，本发明操作方便、设备简单、显色容易，同时展开速率快，规范了沙牛的鉴别方法。

为实现上述技术目的，具体鉴别方法包括以下步骤：

（1）收集沙牛样品，同时确定沙牛的对照药材；

（2）考察样品的适用性，考察水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物四项指标，均根据《中国药典》2015年版四部通则里的检测方法进行检测，拟定样品中水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物的限值；

（3）含量测定：沙牛为动物药，富含氨基酸、蛋白质，参照《中国药典》2015年版四部通则0704氮测定法第二法测定沙牛总氮含量，拟定样品中总氮含量限值；

（4）沙牛胆固醇薄层色谱鉴别：取样品粉末1g，加甲醇25mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取沙牛对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取胆固醇对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液5～10μL，对照品溶液5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(16∶2∶1∶0.6)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以5%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；

耐用性实验考察：采用点状点样对不同薄层板，不同展开温度：28℃、4℃，不同相对湿度：84%、32%进行考察；