[发明专利]异源代谢途径生产酪醇及羟基酪醇的方法

权利要求书

1.一种异源生产酪醇的方法，其特征在于：在大肠杆菌中，表达ARO10基因和ADH6基因，其中ARO10基因是来源于酿酒酵母的酮酸脱羧酶，ADH6基因是来源于酿酒酵母的醇脱氢酶，培养上述大肠杆菌生产酪醇。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括：在大肠杆菌中过表达来源于细菌，真菌或蛋白质工程改造，编码莽草酸途径TyrA^fbr, PpsA, TktA 和AroG^fbr的基因tyrA^fbr, ppsA, tktA和aroG^fbr。

3.一种异源生产羟基酪醇的方法，其特征在于：在大肠杆菌中，表达ARO10基因、ADH6基因和4-羟基苯乙酸3-单加氧酶HpaBC的基因，其中ARO10基因是来源于酿酒酵母的酮酸脱羧酶，ADH6基因来是来源于酿酒酵母的醇脱氢酶，培养上述大肠杆菌生产羟基酪醇。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：

在大肠杆菌中过表达来源于细菌，真菌或蛋白质工程改造，编码莽草酸途径TyrA^fbr,PpsA, TktA 和AroG^fbr的基因tyrA^fbr, ppsA, tktA和aroG^fbr。

5.如权利要求1-4任意一项所述的方法，其特征在于：引入了双相培养的方法来减少产物对细胞毒性，其中，双相培养中有机相溶剂是正癸醇；水相与有机相体积比为（0.5-4）:1；有机相添加方式为1-4次等量添加，添加时间为发酵开始后0h-36h。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：在含有葡萄糖、甘油或酪氨酸的培养基中培养大肠杆菌，选用相当于发酵液体积1%-4%的接种量，加入的诱导剂浓度为0.25mM-1mM，选用37℃的诱导温度。