[发明专利]红鱼眼组织培养快繁方法

权利要求书

1.一种红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、外植体的选择与消毒：取红鱼眼健壮植株新萌发的嫩芽，将嫩芽依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴/100ml吐温-20的0.1％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得外植体；

步骤二、无菌试管苗获取：将步骤一得到的外植体置于超净工作台内，用解剖刀切成长1.0-1.5cm的带有一个腋芽的茎段，接种到MS诱导培养基中，于培养室内培养30天得无菌试管苗，其中，MS诱导培养基为：MS+0.5-1.5mg/L6-BA+0.1-0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8；

步骤三、增殖培养：将步骤二中得到的无菌试管苗接种到MS增殖培养基中，于培养室内培养30天得丛生芽，其中，MS增殖培养为：

MS+0.5-1.5mg/L6-BA+0.1-0.5mg/LIBA+0.1-0.5mg/LKT+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8；

步骤四、壮苗培养：将步骤三中得到的丛生芽接种到MS壮苗培养基中，于培养室内培养30天得健壮植株，其中，MS壮苗培养基为：

MS+0.1-1.0mg/L2,4-D+0.5-1.5mg/L6-BA+0.1-1.0mg/LGA₃₊30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8；

步骤五、生根培养：将步骤四中得到的健壮植株接种到MS生根培养基中，于培养室内培养30天得完整带根苗，其中，MS生根培养基为：

MS+0.5-4.0mg/LNAA+0.5-3.0mg/L6-BA+10g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8；

步骤六、炼苗与移栽：将步骤五得到的完整带根苗在室温为25℃的室内打开组培瓶的瓶盖，瓶内加少量自来水，炼苗4-7天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，并立即移栽到培养基质中培养30天，得大田移栽苗，其中，培养基质主要由蛭石和泥炭土按质量比1:1配制而成。

2.如权利要求1所述的红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，所述MS诱导培养基为：MS+1.0mg/L6-BA+0.25mg/LNAA+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8。

3.如权利要求1所述的红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，所述MS增殖培养为：MS+1.0mg/L6-BA+0.25mg/LIBA+0.25mg/LKT+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8。

4.如权利要求1所述的红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，所述MS壮苗培养基为：MS+0.5mg/L2,4-D+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LGA₃₊30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8。

5.如权利要求1所述的红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，所述MS生根培养基为：MS+2.0mg/LNAA+1.6mg/L6-BA+10g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8。

6.如权利要求1所述的红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，步骤二、步骤三、步骤四和步骤五中的培养室内培养条件为：培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天。

7.如权利要求1所述的红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，步骤六中，所述培养基质由蛭石、泥炭土、滑石粉、安息香粉和白芨粉按质量比10:10:2:1:0.6配制而成。

8.如权利要求1所述的红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，步骤六中，培养基质中培养条件为：第1到7天，培养温度23-27℃，空气湿度70-80％，光照强度1500lux，光照时间8-10小时/天；第8-17天，培养温度25-29℃，空气湿度70-80％，光照强度2500lux，光照时间为8-10小时/天；培养第18-30天，培养温度28-32℃，空气湿度80-90％，自然光照；培养过程中每天早晚各喷施800-1000倍促生长液一次，所述促生长液由辣木叶提取物、壳聚糖、氨基酸螯合锌、氨基酸螯合硼、氨基酸螯合钾和水按照质量比10:7:2:1:1:100配制而成，其中，所述辣木叶提取物的制备方法为：将15重量份的辣木叶粉加入100重量份的水中，于95-100℃下密闭提取30-60分钟后，经过滤、减压浓缩和喷雾干燥制得。