[发明专利]一种透明质酸的生物发酵生产工艺

权利要求书

1.一种透明质酸的生物发酵生产工艺，其特征在于，其包括：

菌种活化：将菌种接种于斜面菌种培养基上活化得到活化菌种；

种子液制备：将活化菌种接种于种子培养基培养得到种子液；

扩大培养：将种子液接种于扩大培养基中扩大培养得到扩大培养液；

发酵培养：将扩大培养液接种至装有发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养，发酵培养分为发酵前期和发酵后期；发酵前期持续4-6h，温度为35-37℃，发酵后期持续16-24h，温度为28-32℃；发酵培养过程中，保持pH 7.0-7.5。

2.根据权利要求1所述的透明质酸的生物发酵生产工艺，其特征在于，发酵培养基的成分及含量分别为:葡萄糖35-40g/L，蔗糖5-10g/L，酵母粉10-12g/L，尿素5-8g/L，蛋白胨5-8g/L，K₂HPO₄ 2.0-2.4g/L，MgSO₄•7H₂O 0.5-1.0g/L。

3.根据权利要求2所述的透明质酸的生物发酵生产工艺，其特征在于，种子培养基和扩大培养基的成分及含量与发酵培养基一致。

4.根据权利要求3所述的透明质酸的生物发酵生产工艺，其特征在于，从进入发酵后期开始，每隔4-6h添加一次发酵培养基，共添加四次；四次添加的发酵培养基的体积之比依次为1：2：4：8，且添加总体积等于原始的发酵培养基的体积。

5.根据权利要求1所述的透明质酸的生物发酵生产工艺，其特征在于，在所述发酵后期，向发酵液中加入吐温80溶解于质量分数为2-4%稀碱中的溶液，至吐温80在发酵液中的质量分数为0.04-0.06%。

6.根据权利要求5所述的透明质酸的生物发酵生产工艺，其特征在于，在所述发酵后期，向发酵液中加入尿嘧啶核苷酸，至其在发酵培养基中的质量分数为0.08-0.1%。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的透明质酸的生物发酵生产工艺，其特征在于，发酵培养过程保持4-8L/min的通气速率，并且发酵前期的搅拌速率为180-220r/min，发酵后期的搅拌速率为250-350r/min。

8.根据权利要求7所述的透明质酸的生物发酵生产工艺，其特征在于，发酵培养过程中，接种的扩大培养液与发酵培养基的体积比为1:5-8。