[发明专利]一种从沙棘中提取的活性多肽在审
申请号: | 201711044586.1 | 申请日: | 2017-10-31 |
公开(公告)号: | CN108065411A | 公开(公告)日: | 2018-05-25 |
发明(设计)人: | 董珊珊 | 申请(专利权)人: | 海盐县凌特生物科技有限公司 |
主分类号: | A23L33/18 | 分类号: | A23L33/18 |
代理公司: | 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙) 11548 | 代理人: | 李静 |
地址: | 314300 浙江省嘉兴市海盐县*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 活性多肽 胃蛋白酶 二次酶解 酶解反应 脱脂 酶解 沙棘 氨基 蛋白质结构 碱性蛋白酶 强酸性环境 原料预处理 二氢吲哚 辅助酶解 交替间隔 聚合产物 聚合反应 微波辐射 超滤膜 超声波 酶解液 沙棘籽 双频率 羟甲基 提纯 亲电 聚合 | ||
1.一种从沙棘中提取的活性多肽,其特征在于:所述活性多肽的分子量介于3-10KD之间,所述活性多肽的提取方法包括:原料预处理、种子粉脱脂、初次酶解、二次酶解、纯化。
2.根据权利要求1所述的一种从沙棘中提取的活性多肽,其特征在于:所述原料预处理步骤为:挑选去壳无变质、无病虫、干净健康的沙棘籽,破碎后置于烘箱中,在55-60℃下干燥24-36小时,用粉碎机粉碎后过筛,筛网目数为200-300目,得沙棘籽粉。
3.根据权利要求1所述的一种从沙棘中提取的活性多肽,其特征在于:所述种子粉脱脂步骤为:将沙棘籽粉置于超临界CO
4.根据权利要求1所述的一种从沙棘中提取的活性多肽,其特征在于:所述初次酶解步骤为:按照料液比1:12-14将沙棘籽脱脂粉溶于蒸馏水中,调节温度为36-37℃、pH为8.4-8.7,加入3000-4000U/g碱性蛋白酶,水解1.5-2.0小时后水浴灭酶;加入酶解液0.8-0.9倍的蒸馏水,调节温度为48-50℃、pH7.0-7.2,加入5000-6000U/g木瓜蛋白酶,水解2.0-3.0小时后水浴灭酶。
5. 根据权利要求1所述的一种从沙棘中提取的活性多肽,其特征在于:所述二次酶解步骤为:将初次酶解液降温至36-37℃,调节pH为2.5-2.8,加入2000-2800U/g胃蛋白酶水解15-20分钟,加入胃蛋白酶重量10-28‰的(S)-1-氨基-2-羟甲基二氢吲哚,继续反应15-20分钟,酶解过程中以酶解过程中以双频率复合超声与微波辐射交替间隔辅助酶解,酶解完成后沸水浴灭活20-25分钟,静置15-30分钟,经2000-3500 r/min、0-4℃离心15-25分钟,取上清液。
6.根据权利要求5所述的一种从沙棘中提取的活性多肽,其特征在于:所述酶解步骤中的频率复合超声与微波辐射交错间隔辅助酶解的步骤为:开启双频率超声波50-55秒,关闭超声波,开启微波辐射5-10秒,关闭微波辐射;开启双频率超声波50-55秒,关闭超声波,开启微波辐射5-10秒,关闭微波辐射。
7.根据权利要求5所述的一种从沙棘中提取的活性多肽,其特征在于:所述酶解步骤中的双频率超声波的超声频率与超声密度分别为34-35kHz、0.34-0.35W/cm
8.根据权利要求1所述的一种从沙棘中提取的活性多肽,其特征在于:所述纯化:然后用超滤装置让酶解液依次通过3KD、10KD的超滤膜,收集3-10KD分子段的酶解液,低温干燥后以-80~-100℃冷冻保藏。
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