[发明专利]一种逆流色谱拆分反式帕罗醇的方法

说明书

本发明提供了一种采用逆流色谱技术拆分反式帕罗醇的方法，本发明以反式帕罗醇为拆分对象，以羟丙基‑β‑环糊精作为手性试剂，将其添加到水相中，采用液‑液分配手性萃取拆分的方法筛选溶剂体系，并用逆流色谱法得到(+)‑帕罗醇和(‑)‑帕罗醇；本发明首次采用逆流色谱拆分含哌啶环的醇类化合物反式帕罗醇消旋体，本方法可以基本达到分离目的，可以分离得到(‑)‑帕罗醇和(+)‑帕罗醇的单体，其纯度均大于98％。

(一)技术领域

本发明涉及一种外消旋体的拆分方法，具体涉及一种通过逆流色谱从反式帕罗醇中拆分出(+)-帕罗醇和(-)-帕罗醇的方法。

(二)背景技术

帕罗醇是一类含有哌啶环的醇类药物中间体，反式左旋帕罗醇是帕罗西汀合成的关键手性起始原料，盐酸帕罗西汀是5-羟色胺再摄取阻滞剂类抗抑郁药物，主要用于治疗抑郁症和伴有焦虑症的抑郁症患者。目前关于此类化合物的手性拆分方法研究较少。帕罗醇有2个手性中心，共有4个光学异构体，反式帕罗醇则具有2个光学异构体。根据开发立体异构新药的技术要求及确保药物的安全、有效，需要对手性起始原料的所有光学异构体进行检测。因此，对反式帕罗醇手性拆分建立一种快速、有效的方法是一个具有理论及实际意义的课题。目前，反式帕罗醇的拆分方法主要有化学拆分法、高效液相色谱法等。

逆流色谱(countercurrent chromatography，CCC)是一种连续的不需要固体载体的现代色谱分离技术，相比高效液相色谱而言，可避免固相吸附带来的污染和样品损失，且进样量大，运行成本低，是手性分离的一种理想的制备色谱技术。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种采用逆流色谱技术拆分反式帕罗醇的方法。本发明以反式帕罗醇为拆分对象，以羟丙基-β-环糊精作为手性试剂，将其添加到水相中，采用液-液分配手性萃取拆分的方法筛选溶剂体系，并用逆流色谱法得到(+)-帕罗醇和(-)-帕罗醇。

本发明的技术方案如下：

一种反式帕罗醇的手性拆分方法，所述方法按如下步骤进行：

(1)将有机溶剂与含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液按照体积比1：0.5～10(优选1：1)组成溶剂体系，混合均匀，静置分层，分液得到有机相和水相；

所述有机溶剂为乙酸乙酯、乙酸异丁酯或乙酸丁酯，优选乙酸丁酯；

所述含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液的pH值为9.1～9.3，优选pH值为9.2；

所述含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中羟丙基-β-环糊精的浓度为0.09～0.15mol/L，优选0.1mol/L；

(2)将反式帕罗醇用步骤(1)得到的水相溶解，制成样品；

所述样品中反式帕罗醇的浓度为1.0～4.0mg/mL，优选2.0mg/mL；

(3)采用逆流色谱法拆分反式帕罗醇：以步骤(1)得到的有机相为固定相，水相为流动相，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为5～10℃，开启速度控制器，转速为800～1000rpm(优选800rpm)，以1.5～2.0mL/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，即当流动相从色谱柱出口处流出时，将步骤(2)制得的样品由进样阀进样，紫外检测器在波长254nm下检测流出液，按照时间梯度，用自动部份收集器分别收集100min到260min之间梯度时间间隔的洗脱液，并根据紫外检测谱图中对映体双峰出现的时间段，将前峰对应时间段内收集的洗脱液合并即得含目标组分(-)-帕罗醇单体的前峰洗脱液，将后峰对应时间段内收集的洗脱液合并即得含目标组分(+)-帕罗醇单体的后峰洗脱液，从而实现(-)-帕罗醇单体和(+)-帕罗醇单体的分离；

所述前峰是指对映体双峰中按时间顺序先出来的主峰，所述后峰是指对映体双峰中按时间顺序后出来的主峰；