[发明专利]一种逆流色谱拆分反式帕罗醇的方法

权利要求书

1.一种反式帕罗醇的手性拆分方法，其特征在于，所述方法按如下步骤进行：

(1)将有机溶剂与含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液按照体积比1：0.5～10组成溶剂体系，混合均匀，静置分层，分液得到有机相和水相；

所述有机溶剂为乙酸异丁酯或乙酸丁酯；

所述含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液的pH值为9.1～9.3；

所述含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中羟丙基-β-环糊精的浓度为0.09～0.15mol/L；

(2)将反式帕罗醇用步骤(1)得到的水相溶解，制成样品；

所述样品中反式帕罗醇的浓度为1.0～4.0mg/mL；

(3)采用逆流色谱法拆分反式帕罗醇：以步骤(1)得到的有机相为固定相，水相为流动相，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为5～10℃，开启速度控制器，转速为800～1000rpm，以1.5～2.0mL/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，即当流动相从色谱柱出口处流出时，将步骤(2)制得的样品由进样阀进样，紫外检测器在波长254nm下检测流出液，按照时间梯度，用自动部份收集器分别收集100min到260min之间梯度时间间隔的洗脱液，并根据紫外检测谱图中对映体双峰出现的时间段，将前峰对应时间段内收集的洗脱液合并即得含目标组分(-)-帕罗醇单体的前峰洗脱液，将后峰对应时间段内收集的洗脱液合并即得含目标组分(+)-帕罗醇单体的后峰洗脱液，从而实现(-)-帕罗醇单体和(+)-帕罗醇单体的分离；

所述前峰是指对映体双峰中按时间顺序先出来的主峰，所述后峰是指对映体双峰中按时间顺序后出来的主峰。

2.如权利要求1所述的反式帕罗醇的手性拆分方法，其特征在于，步骤(1)中，所述有机溶剂与含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液按照体积比1：1组成溶剂体系。

3.如权利要求1所述的反式帕罗醇的手性拆分方法，其特征在于，步骤(1)中，所述有机溶剂为乙酸丁酯。

4.如权利要求1所述的反式帕罗醇的手性拆分方法，其特征在于，步骤(1)中，所述含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液的pH值为9.2。

5.如权利要求1所述的反式帕罗醇的手性拆分方法，其特征在于，步骤(1)中，所述含有羟丙基-β-环糊精的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中羟丙基-β-环糊精的浓度为0.1mol/L。

6.如权利要求1所述的反式帕罗醇的手性拆分方法，其特征在于，步骤(2)中，所述样品中反式帕罗醇的浓度为2.0mg/mL。

7.如权利要求1所述的反式帕罗醇的手性拆分方法，其特征在于，步骤(3)中，所述自动部份收集器按每2～3min梯度时间间隔收集一次洗脱液。

8.如权利要求1所述的反式帕罗醇的手性拆分方法，其特征在于，步骤(3)中，所述(-)-帕罗醇单体、(+)-帕罗醇单体按如下方法分别从前峰洗脱液、后峰洗脱液中回收：将前峰洗脱液和后峰洗脱液分别用氨水调节pH值至10～11，再用氯仿萃取2～3次，合并氯仿层，用水洗涤至中性，再经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液蒸除溶剂，残余物质用二氯甲烷溶解后，经硅胶柱层析纯化，即分别获得(-)-帕罗醇单体和(+)-帕罗醇单体。