[发明专利]一种基于DNA特异片段的熊本牡蛎（Crassostreasikamea）鉴定方法在审
| 申请号： | 201711041921.2 | 申请日： | 2017-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN107557484A | 公开（公告）日： | 2018-01-09 |
| 发明（设计）人： | 王桃妮;程起群;刘一萌;范瑞良;修玉娜;孙兆跃;全为民 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司31227 | 代理人： | 曹莉 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 dna 特异 片段 熊本 牡蛎 crassostreasikamea 鉴定 方法 | ||
1.一种基于DNA特异片段的熊本牡蛎鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取牡蛎基因组DNA；
(2)用引物对步骤(1)中的牡蛎基因组DNA进行PCR扩增，得到目的片段的PCR产物；其中，上游引物为Cs-F2：
5`-CGAAGAGGGGCATGATAAATGAGG-3`，下游引物为Cs-R2：
5`-ATATGAACTTCTCCAACCTCCCC-3`；
(3)将步骤(2)中的PCR产物进行凝胶电泳，在100bp出现信号带的即为熊本牡蛎。
2.根据权利要求1所述的熊本牡蛎的分子鉴别方法，其特征在于，步骤(1)中提取牡蛎基因组DNA的方法为用海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒提取。
3.根据权利要求1所述的熊本牡蛎的分子鉴别方法，其特征在于，步骤(2)中PCR产物条带中熊本牡蛎的目的片段为114bp。
4.根据权利要求1所述的熊本牡蛎的分子鉴别方法，其特征在于，步骤(2)中PCR扩增的条件为先95℃预变性3min,然后是35个循环，每个循环包括95℃变性15sec，55℃复性15sec，72℃延伸15sec，最后是72℃延伸3min。
5.根据权利要求1所述的熊本牡蛎的分子鉴别方法，其特征在于，步骤(3)中凝胶电泳的条件为3％的琼脂糖凝胶。
6.根据权利要求1所述的熊本牡蛎的分子鉴别方法，其特征在于，步骤(3)中凝胶电泳的条件为：电压200V，时间28min，缓冲液为TBE。
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