[发明专利]双羰基还原酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 201711040940.3 | 申请日： | 2014-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN107603961B | 公开（公告）日： | 2020-04-24 |
| 发明（设计）人： | 洪浩;詹姆斯·盖吉;高峰;刘立辉;于文燕;刘芳;郭莉娜;张娜 | 申请（专利权）人： | 凯莱英医药集团（天津）股份有限公司;凯莱英生命科学技术（天津）有限公司;天津凯莱英制药有限公司;凯莱英医药化学（阜新）技术有限公司;吉林凯莱英医药化学有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/62 |
| 代理公司： | 北京律智知识产权代理有限公司 11438 | 代理人： | 于宝庆;崔香丹 |
| 地址： | 300457 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 羰基 还原酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种双羰基还原酶突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4-6任一项所示。
2.根据权利要求1所述的双羰基还原酶突变体的核苷酸编码序列，其中该核苷酸编码序列不是SEQ ID NO：8所示的序列。
3.根据权利要求2所述的核苷酸编码序列，其中所述核苷酸编码序列如SEQ ID NO：12-14任一项所示。
4.一种含有权利要求2或3所述的核苷酸编码序列的表达盒。
5.一种含有有效连接其中的权利要求2或3所述的核苷酸编码序列的重组载体。
6.根据权利要求5所述的重组载体，其中所述重组载体是重组表达载体。
7.一种含有权利要求5或6所述重组载体的宿主细胞。
8.一种生产3R,5S-二羟基化合物的方法，其包括步骤：将权利要求1所述的双羰基还原酶突变体或权利要求2或3所述的核苷酸编码序列编码的蛋白质或利用权利要求4的表达盒或权利要求5或6的重组载体或权利要求7的宿主细胞获得的蛋白质与二酮类化合物在使所述双羰基还原酶发挥作用的条件下接触一段时间，
其中二酮类化合物为已经在市场上商业化的通式I或者容易制备的通式I：
其中，R1选自芳香基、烷基、环烷基、烷基取代的芳香基、卤素取代的芳香基、芳烷杂环基、环状杂烷基或环状杂烷化烷基；R2选自烷基、环烷基、卤烷基或卤环烷基。
9.根据权利要求8所述的生产3R,5S-二羟基化合物的方法，其中所述二酮类化合物选自6-苄氧基-3,5-二氧代-己酸叔丁酯、6-苄氧基-3,5-二氧代-己酸新戊酯、6-苄氧基-3,5-二氧代-己酸甲酯、6-苄氧基-3,5-二氧代-己酸乙酯。
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