[发明专利]一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法

说明书

一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，具体包括制备提取液、浓缩、初步纯化、分离白檀果花色苷、分离白檀果黄酮等步骤，分离得到四种化合物。经过结构鉴定认为其中包括一种花色苷类化合物，具体为飞燕草素‑3‑O‑接骨木二糖苷；还包括三种黄酮类化合物，具体为芦丁、槲皮素‑3‑O‑葡萄糖苷和槲皮素‑3‑O‑鼠李糖苷。本方法分离得到的产品纯度高，且黄酮类化合物具有较强的生物活性，因此研究结果为黄酮标准品制备及白檀果进一步开发利用奠定基础。

技术领域

本发明涉及化合物的分离提纯技术领域，具体为一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法。

背景技术

白檀(Symplocos Paniculata(Thunb)Miq.)是山矾科山矾属小乔木或落叶灌木,又称乌子、碎籽树，广泛分布于世界各地，由于其生长力旺盛、抗逆性强、根系发达，是低山丘陵地区防止水土流失、改善生态环境的理想植物；同时其果实、根、花等具有较高的经济价值以及药用价值。其中白檀果实成熟后转变为蓝色或蓝紫色，可食用，可入药。果实中的籽含油率达36.6％，且其中含有人体必备的两种不饱和脂肪酸，即油酸和亚油酸，含量高达85％，而硬脂酸含量又低，是较为理想、有益健康的食用植物油。

目前对白檀果的研究利用主要集中在油脂方面，包括白檀果含油量的测定及其影响因素等。而关于白檀果中含有的其他化学成分的研究和利用则相对较少。文献(“白檀果肉红色素含量测定及其基本理化性质的初步研究”，陈郑镔、刘剑秋、陈炳华等，闽南师范大学学报(自然版),2007,20(1):108-112.)曾公开了白檀果中含有红色素，并对红色素的理化性质进行了探索研究；另有文献(“白檀叶总黄酮和果肉红色素的初步研究”陈郑镔，福建师范大学,2005.)中曾公开了在白檀叶中发现了黄酮类似物。

虽然，现有技术中已经发现了白檀果肉红色素和白檀叶总黄酮，而其中红色素属于花色苷类化合物，但是却没有从白檀果中提纯并鉴定花色苷类化合物和黄酮类化合物，没有对化合物的具体结构进行探究。而且现有技术中没有公开利用高速逆流色谱(HSCCC)从白檀果中分别分离出高纯度的飞燕草素-3-O-接骨二木糖苷、芦丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-鼠李糖苷。因此，需要提供一种白檀果中黄酮类似物和花色苷类化合物的分离提纯方法，为白檀果进一步的开发利用奠定基础。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明公开了一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，可以从白檀果中同时分离出一种花色苷类化合物和三种黄酮类化合物。

一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备提取液：由白檀鲜果制备白檀果粗提取液；

(2)浓缩：对步骤(1)制得的白檀果粗提取液进行浓缩处理，制得浓缩提取液；

(3)初步纯化：利用大孔吸附树脂柱对由步骤(2)得到的浓缩提取液进行洗脱处理，通过控制洗脱液的组成和加入顺序，将浓缩提取液分离成花色苷粗提取物和黄酮粗提取物；

(4)分离白檀果花色苷：利用高速逆流色谱对由步骤(3)得到的花色苷粗提取物进行分离提纯，得到一种花色苷类化合物，具体为飞燕草素-3-O-接骨二木糖苷；

(5)分离白檀果黄酮：利用高速逆流色谱对由步骤(3)得到的黄酮粗提取物进行分离提纯，得到三种黄酮类化合物，分别为芦丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-鼠李糖苷。

优选的，所述步骤(1)制备提取液具体包括如下步骤：

①称取1.0-2.0Kg白檀鲜果，捣碎备用，量取5-10L质量浓度为40％-70％的乙醇或甲醇水溶液作为提取剂，备用；

②将捣碎的白檀鲜果加入到提取剂中，超声避光浸提20-40min，适时搅拌，过滤；

③取上述过滤所得滤渣，重复进行上述步骤①和②的浸提过程1-2次；