[发明专利]一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法

权利要求书

1.一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备提取液：由白檀鲜果制备白檀果粗提取液；

(2)浓缩：对步骤(1)制得的白檀果粗提取液进行浓缩处理，制得浓缩提取液；

(3)初步纯化：利用大孔吸附树脂柱对由步骤(2)得到的浓缩提取液进行洗脱处理，通过控制洗脱液的组成和加入顺序，将浓缩提取液分离成花色苷粗提取物和黄酮粗提取物；

(4)分离白檀果花色苷：利用高速逆流色谱对由步骤(3)得到的花色苷粗提取物进行分离提纯，得到一种花色苷类化合物，具体为飞燕草素-3-O-接骨二木糖苷；

(5)分离白檀果黄酮：利用高速逆流色谱对由步骤(3)得到的黄酮粗提取物进行分离提纯，得到三种黄酮类化合物，分别为芦丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-鼠李糖苷。

2.根据权利要求1所述的一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，其特征在于，所述步骤(1)制备提取液具体包括如下步骤：

①称取1.0-2.0Kg白檀鲜果，捣碎备用，量取5-10L质量浓度为40％-70％的乙醇或甲醇水溶液作为提取剂，备用；

②将捣碎的白檀鲜果加入到提取剂中，超声避光浸提20-40min，适时搅拌，过滤；

③取上述过滤所得滤渣，重复进行上述步骤①和②的浸提过程1-2次；

④合并上述滤液，即可得到白檀果粗提取液。

3.根据权利要求1所述的一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，其特征在于，所述步骤(2)浓缩具体包括：

(a)设置浓缩温度在45-55℃之间；

(b)对由步骤(1)得到的白檀果粗提取液进行减压浓缩，至浓缩提取液体积为粗提取液体积的1/5-1/15，得到浓缩提取液。

4.根据权利要求1所述的一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，其特征在于，所述步骤(3)初步纯化具体步骤如下：

(A)将由步骤(2)得到的浓缩提取液以1-4BV/h的流速加入到大孔吸附树脂柱中；

(B)浓缩提取液完全加入后，静置20-40min；

(C)然后依次使用3BV水、4-6BV质量浓度为10-15％乙醇和4-6BV质量浓度为60-70％乙醇以3BV/h的流速对上述浓缩提取液进行洗脱，分别收集10-15％乙醇洗脱液和60-70％乙醇洗脱液；

(D)分别对上述洗脱液进行减压浓缩、冷冻干燥处理，由10-15％乙醇洗脱液得到白檀果花色苷粗提取物，由60-70％乙醇洗脱液得到白檀果黄酮粗提取物。

5.根据权利要求4所述的一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱包括NKA-9树脂柱或D101树脂柱。

6.根据权利要求1所述的一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法，其特征在于，所述步骤(4)分离白檀果花色苷具体步骤如下：

a、分别量取4体积份正丁醇、0.3体积份甲基叔丁基醚、1体积份乙腈和5体积份三氟乙酸水溶液混匀，配制成溶剂体系,所述三氟乙酸水溶液中三氟乙酸的体积分数为0.1％，所述溶剂体系会形成上下两层，上层为上相，下层为下相；

b、设置高速逆流色谱的技术参数：主机转速为800-900rpm/min，恒温器温度为20℃，检测器的检测波长为280nmnm，下相的流速为1.5mL/min；

c、称取花色苷粗提取物120mg溶解于20mL下相中，进样，然后根据色谱流出图在142-144min流出液，即得到飞燕草素-3-O-接骨二木糖苷流出液；

d、取上述飞燕草素-3-O-接骨二木糖苷流出液加入大量蒸馏水，混合均匀，在50℃条件下旋转蒸发，至溶液由红色恢复至蓝色，得到飞燕草素-3-O-接骨二木糖苷水溶液；

e、对上述飞燕草素-3-O-接骨二木糖苷水溶液进行浓缩，冷却，干燥，即可得到飞燕草素-3-O-接骨二木糖苷。