[发明专利]一种禽蛋中二噁英及二噁英类多氯联苯的检测方法

权利要求书

1.一种禽蛋中二噁英及二噁英类多氯联苯的检测方法，其特征是包括以下步骤：

(1)样品准备：选取禽蛋，调节温度为90～100℃烘烤至禽蛋中的蛋白凝固，去壳，再调节温度为90～100℃烘烤21～33h，粉碎，混匀，得试验样品备用；

(2)制备待测物：选取步骤(1)中的试验样品，加入净化内标后采用正己烷和乙酸乙酯的混合溶液提取，得提取液，将提取液浓缩后干燥，得待测物，测定待测物的脂肪值；

(3)酸性硅胶净化：将待测物加入正己烷溶解后加入酸性硅胶，摇床震荡后取出，加入装有活化过的无水硫酸钠和玻璃棉的玻璃漏斗中，过滤，采用正己烷洗涤，收集滤液，浓缩，得浓缩液a；

(4)多段硅胶柱净化：从下至上按照玻璃棉、无水氯化钠、中性硅胶、碱性硅胶、中性硅胶、酸性硅胶、中性硅胶和无水硫酸钠的顺序干法装填形成多段硅胶柱，将浓缩液a过柱，用正己烷和二氯甲烷的混合溶液洗涤，浓缩，得浓缩液b；

(5)凝胶色谱柱净化：将浓缩液b过凝胶色谱柱，采用正己烷和二氯甲烷的混合溶液进行预冲洗、冲洗和洗涤后，取洗涤液，浓缩，得浓缩液c；

(6)碱性氧化铝柱+Florisil柱净化或活性炭层析柱净化：从下至上按照玻璃棉、Florisil、碱性氧化铝和无水硫酸钠的顺序干法装柱，得碱性氧化铝柱+Florisil柱，或者将活性炭采用干法装柱，得活性炭层析柱，将浓缩液c过柱，先采用正己烷和二氯甲烷的混合溶液洗涤，得二噁英类多氯联苯洗涤液，接着采用二氯甲烷洗涤，得二噁英洗涤液，分别经氮气吹扫浓缩，得二噁英浓缩液d1和二噁英类多氯联苯浓缩液d2；

(7)上机检测：将浓缩液d1和浓缩液d2复溶后加入仪器内标，采用高分辨气相色谱/双聚焦磁式质谱联用仪HRGC/HRMS检测，分别获得禽蛋中二噁英及二噁英类多氯联苯的含量；

步骤(2)中所述试验样品与所述正己烷和乙酸乙酯的混合溶液的用量关系为10g：200～350mL，所述正己烷和乙酸乙酯的混合溶液中正己烷和乙酸乙酯二者的体积比为1：0.5～1.5；

步骤(7)中采用高分辨气相色谱/双聚焦磁式质谱联用仪HRGC/HRMS检测时，二噁英PCDD/Fs检测时的质谱条件为：EI+，SIM，分辨率R≥10000，色谱柱：DB-5MS柱；柱温：90℃，1.0min，以76℃/min升至200℃，7.0min，1.2℃/min升至275℃，1.7℃/min升至300℃，进样口、离子源和传输线温度分别是260℃、250℃和305℃；载气：He，流速为0.8mL/min；无分流进样1μL；电子发射能：55ev，灯丝电流：0.80mA；

步骤(7)中采用高分辨气相色谱/双聚焦磁式质谱联用仪HRGC/HRMS检测时，二噁英类多氯联苯DL-PCBs检测时的质谱条件为：EI+，SIM，分辨率R≥10000；色谱柱：DB-5MS毛细管柱；进样量：1μL；检测温度：进样口250℃；传输线温度：280℃；升温条件：90℃，2min，以13℃/min升至220℃，5℃/min升至300℃；载气：He，流速为1mL/min。

2.根据权利要求1所述的禽蛋中二噁英及二噁英类多氯联苯的检测方法，其特征是：步骤(1)中所述禽蛋包括但不限于鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鸽蛋、鹌鹑蛋和蛇蛋；烘烤采用电加热烤箱烘烤或红外干燥器烘烤。

3.根据权利要求1所述的禽蛋中二噁英及二噁英类多氯联苯的检测方法，其特征是：步骤(2)中采用正己烷和乙酸乙酯提取时采用索氏提取器提取或快速萃取仪提取。

4.根据权利要求1所述的禽蛋中二噁英及二噁英类多氯联苯的检测方法，其特征是：步骤(3)中所述待测物与所述酸性硅胶的质量份配比为1：5～6，所述酸性硅胶是酸的质量百分含量为30～50％的酸性硅胶，摇床震荡时速度为100r/min～300r/min，震荡时间为0.5h～5h。

5.根据权利要求1所述的禽蛋中二噁英及二噁英类多氯联苯的检测方法，其特征是：步骤(4)中的多段硅胶柱净化、步骤(5)中的凝胶色谱柱净化和步骤(6)中的碱性氧化铝柱+Florisil柱净化或活性炭层析柱净化顺序可调。