[发明专利]快速鉴定大豆疫霉β-tubulin基因核苷酸点突变及其对噻唑菌胺抗药性的方法有效
| 申请号： | 201711014310.9 | 申请日： | 2017-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN107746894B | 公开（公告）日： | 2020-05-26 |
| 发明（设计）人： | 刘西莉;彭钦;方媛;王治文;刘莹;刘鹏飞;黄中乔;薛昭霖;李腾蛟 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王莹;吴欢燕 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 鉴定 大豆 tubulin 基因 核苷酸 突变 及其 噻唑 抗药性 方法 | ||
1.一种检测或辅助检测大豆疫霉菌中β-tubulin基因是否存在突变位点的方法，包括如下步骤：
以待测大豆疫霉菌的基因组DNA为模板，用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4以及SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示引物对分别进行PCR扩增，若分别能扩增出354bp，244bp和284bp条带，则所述待测大豆疫霉菌中β-tubulin基因存在突变位点；所述PCR扩增中，退火温度分别为66.7℃，66.7℃和68.1℃；所述突变位点指大豆疫霉菌中β-tubulin基因的基因组序列自5'末端起第23位核苷酸为T纯合，第772位核苷酸为G纯合和第494位核苷酸为A纯合；由此分别导致大豆疫霉β-tubulin蛋白自N端起第8位氨基酸为纯合的亮氨酸，第258位氨基酸为纯合的缬氨酸和第165位氨基酸为纯合的酪氨酸。
2.一种检测或辅助检测大豆疫霉菌中β-tubulin基因是否存在突变位点的引物对，由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4以及SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示DNA分子组成。
3.权利要求1所述方法在鉴定大豆疫霉菌抗药性中的应用；所述抗药性为抗噻唑酰胺类杀菌剂。
4.权利要求2所述的引物对在鉴定大豆疫霉菌抗药性中的应用；所述抗药性为抗噻唑酰胺类杀菌剂。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：具有所述突变位点的大豆疫霉菌具有抗噻唑酰胺类杀菌剂的抗药性。
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