[发明专利]一种快速鉴别南、北疆分布的新疆裸重唇鱼的分子生物学方法

权利要求书

1.一种快速鉴别南、北疆分布的新疆裸重唇鱼的分子生物学方法，其特征在于：所述分子生物学方法的具体技术方案为：

1)提取南、北疆分布的新疆裸重唇鱼基因组DNA；

2)利用PCR反应扩增新疆裸重唇鱼基因组中Tc1类转座子；

3)对扩增产物用进行电泳分离，染色，构建新疆裸重唇鱼DNA电泳模式图；

4)鉴定南、北疆分布的新疆裸重唇鱼；

所述PCR反应引物序列为：5′-TAC AGT TGA AGT CGG AAG TTT ACA TAC-3′

所述Tc1类转座子在南疆群体中只有一条扩增主带，在北疆群体中有两条扩增主带。

2.根据权利要求1所述的一种快速鉴别南、北疆分布的新疆裸重唇鱼的分子生物学方法，其特征在于：所述PCR反应总体系为：10×buffer 2.5μL，Mg²⁺终浓度为2.0mM，2.5mM的dNTP 2μL，Taq聚合酶1units，10μM的引物各1μL，新疆裸重唇鱼基因组DNA 1μL或0.5μg，加灭菌水至终体积25μL。

3.根据权利要求1所述的一种快速鉴别南、北疆分布的新疆裸重唇鱼的分子生物学方法，其特征在于：所述电泳分离步骤为：称量0.7g琼脂糖加入70mL 1×TAE缓冲液的锥形瓶中，微波炉加热煮沸，使琼脂粉完全溶解，待凝胶液稍凉至50-60℃，加入7μL核酸染料Gelview，轻轻摇匀后将胶缓缓倒入胶槽内，待琼脂糖凝胶完全凝固后竖直拔掉梳子，清除碎胶并将胶槽放入电泳槽内，将电泳缓冲液加入电泳槽中，直至没过凝胶面0.5cm，然后将2.5μL PCR产物与0.5μL 6×DNA loading buffer混合后依次加入点样孔，并点上6μL100bp DNA Marker，接通电泳槽和电泳仪的电源后开始电泳，电泳完毕通过凝胶成像系统照相，调节光圈和曝光时间，选择合适的滤光片，得到成像清晰、背景较低的照片。

4.根据权利要求3所述的一种快速鉴别南、北疆分布的新疆裸重唇鱼的分子生物学方法，其特征在于：所述DNA Marker片段大小为：2000bp，1600bp，1000bp，750bp，500bp，250bp，100bp。

5.根据权利要求3所述的一种快速鉴别南、北疆分布的新疆裸重唇鱼的分子生物学方法，其特征在于：所述琼脂糖凝胶电泳检测步骤中电泳电压设定为120V，电流400mA，时间25min。