[发明专利]用于检测乙肝癌变易感基因多态性的引物对及试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测乙肝癌变易感基因多态性的引物对，其特征在于，所述乙肝癌变易感基因检测的多态性位点为HLA-DQ rs9275319和STAT4 rs2242480，所述引物对为焦磷酸测序引物对，其包括：

HLA-DQ正向扩增引物：5′-CTGAAGGCTGCACTGTCAGC-3′；

HLA-DQ反向扩增引物：5′-TATAATAGTGCATAATATAAT-3′；

HLA-DQ测序引物：5′-GCTATAGGCTGCACGATG-3′；

STAT4正向扩增引物：5′-GAAAATTACATGAGTGTG-3′；

STAT4反向扩增引物：5′-TTATGATGAAAATAGCTTTATA-3′；

STAT4测序引物：5′-TACAGTGCGTGTCCACACTG-3′；

其中，所述HLA-DQ反向扩增引物和STAT4反向扩增引物的5’端进行生物素标记。

2.一种用于检测乙肝癌变易感基因多态性的试剂盒，其特征在于，所述乙肝癌变易感基因检测的多态性位点为HLA-DQ rs9275319和STAT4 rs2242480，所述试剂盒包括：

PCR反应液1，所述PCR反应液1含有HLA-DQ正向扩增引物：5’-CTGAAGGCTGCACTGTCAGC-3’；

PCR反应液2，所述PCR反应液2含有STAT4正向扩增引物：5′-GAAAATTACATGAGTGTG-3′；

HLA-DQ反向扩增引物：5’-TATAATAGTGCATAATATAAT-3’；

STAT4反向扩增引物：5′-TTATGATGAAAATAGCTTTATA-3′；

HLA-DQ测序引物：5’-GCTATAGGCTGCACGATG-3’；

STAT4测序引物：5′-TACAGTGCGTGTCCACACTG-3′；

其中，所述HLA-DQ反向扩增引物和STAT4反向扩增引物的5’端进行生物素标记。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：HLA-DQ阳性对照品1，其为插有SEQIDNO.7所示核苷酸序列的HLA-DQ野生纯合子质粒；

HLA-DQ阳性对照品2，其为插有SEQIDNO.8所示核苷酸序列的HLA-DQ突变纯合子质粒和所述HLA-DQ野生纯合子质粒组成的HLA-DQ质粒混合物；

HLA-DQ阳性对照品3，其为插有SEQIDNO.8所示核苷酸序列的HLA-DQ突变纯合子质粒；

STAT4阳性对照品1，其为插有SEQIDNO.9所示核苷酸序列的STAT4野生纯合子质粒；

STAT4阳性对照品2，其为插有SEQIDNO.10所示核苷酸序列的STAT4突变纯合子质粒和所述STAT4野生纯合子质粒组成的STAT4质粒混合物；

STAT4阳性对照品3，其为插有SEQIDNO.10所示核苷酸序列的STAT4突变纯合子质粒；

其中，质粒载体为pMD18-T质粒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述HLA-DQ质粒混合物中所述HLA-DQ突变纯合子质粒和所述HLA-DQ野生纯合子质粒的数量比为1:1；所述STAT4质粒混合物中所述STAT4突变纯合子质粒和所述STAT4野生纯合子质粒的数量比为1:1。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括空白对照品，所述空白对照品为灭菌纯化水。

6.权利要求1所述的引物对在制备用于焦磷酸测序法检测HLA-DQ和STAT4基因多态性的试剂中的应用。

7.权利要求2所述的试剂盒在制备用于焦磷酸测序法检测HLA-DQ和STAT4基因多态性的试剂中的应用。