[发明专利]一种治疗复发性HSK的双基因靶向治疗系统有效
申请号: | 201711005288.1 | 申请日: | 2017-10-25 |
公开(公告)号: | CN107541527B | 公开(公告)日: | 2018-11-30 |
发明(设计)人: | 徐琨;刘先宁;朱秀萍;程燕;郑璇 | 申请(专利权)人: | 陕西省眼科研究所 |
主分类号: | C12N15/869 | 分类号: | C12N15/869;C12N15/23;C12N15/113;A61K48/00;A61K31/7088;A61K47/46;A61P27/02;A61P31/22 |
代理公司: | 陕西增瑞律师事务所 61219 | 代理人: | 张瑞琪 |
地址: | 710002 陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 治疗 复发 hsk 基因 靶向 系统 | ||
1.一种双基因靶向治疗系统rdHSV1-IFNγ-siRNA,其特征在于,至少包含复制缺陷型载体rdHSV1; 来自于人血液淋巴细胞的IFNγ基因序列,所述IFNγ基因序列由序列表中的SEQ ID NO:1所示;siRNA核苷酸序列,所述siRNA核苷酸序列由序列表中的SEQ ID NO:2所示。
2.如权利要求1所述的双基因靶向治疗系统rdHSV1-IFNγ-siRNA,其特征在于,所述复制缺陷型载体rdHSV1通过将单纯疱疹病毒HSV1中的ICP4、ICP34.5和ICP27基因删除,突变VP16基因而得到。
3.一种权利要求1所述的双基因靶向治疗系统rdHSV1-IFNγ-siRNA的构建方法,其特征在于,具体方法为:
删除单纯疱疹病毒HSV1中ICP4、ICP34.5和ICP27基因,突变VP16基因,得到复制缺陷型载体rdHSV1;
对LAT基因靶序列进行筛选、靶位证实,做出一条siRNA核苷酸序列,其序列由序列表中的SEQ ID NO:2所示;
分离人血液淋巴细胞,接种HSV1病毒诱导入IFNγ基因,提取淋巴细胞总RNA,反转cDNA,获取IFNγ基因序列,其序列由序列表中的SEQ ID NO:1所示;
将IFNγ基因序列与siRNA序列分别连入穿梭质粒,与复制缺陷型载体rdHSV1进行同源重组,获得双基因靶向治疗系统rdHSV1-IFNγ-siRNA。
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