[发明专利]一种浓缩脂肪干细胞培养上清制剂、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种浓缩脂肪干细胞培养上清制剂，其特征在于：所述浓缩脂肪干细胞培养上清制剂主要由脂肪组织来源的间充质干细胞培养的细胞培养液的上清液浓缩而得。

2.根据权利要求1所述的浓缩脂肪干细胞培养上清制剂，其特征在于：还添加有hrEGF、VEGF和bFGF。

3.根据权利要求2所述的浓缩脂肪干细胞培养上清制剂，其特征在于：所述浓缩的倍数为3～6倍，所述浓缩的方法为透析法。

4.一种权利要求2或3所述浓缩脂肪干细胞培养上清制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1取脂肪细胞，使用生理盐水进行清洗，然后加入等体积的胶原酶消化，消化后离心，去上清液；

S2置入脂肪干细胞无血清培养基，重悬后转入细胞培养瓶进行培育；

S3收集传代前的上清液，将上清液浓缩后制成细胞培养液，添加hrEGF、VEGF和bFGF即得。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：S1中，所述胶原酶为I型胶原酶，所述消化的时间为30～60min，所述I型胶原酶的浓度为0.1％～0.5％。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：S1中，所述离心具体为：将消化后的脂肪细胞用直径为70μm的滤膜过滤，再在2000rpm/min的条件下离心5～10min。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：S2中，所述脂肪干细胞无血清培养基中添加有hrEGF、VEGF和bFGF，hrEGF、VEGF和bFGF添加后的培养基中的浓度分别为0.08～0.15μg/mL、0.05～0.11μg/mL和0.01～0.10μg/mL。

8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：S3中，浓缩后经直径0.22μm滤膜过滤除菌，添加hrEGF、VEGF和bFGF后所得浓缩脂肪干细胞培养上清制剂中hrEGF、VEGF和bFGF的浓度分别为0.08～0.15μg/mL、0.05～0.11μg/mL和0.01～0.10μg/mL。

9.一种权利要求1～3任一所述浓缩脂肪干细胞培养上清制剂在制备治疗烫伤的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述烫伤包括火焰、热液、电、强酸和强碱所引起的组织损伤，所述药物包括液剂、粉剂、雾剂和贴敷药膏。