[发明专利]一种耐高温云耳菌株的室内筛选方法

说明书

技术领域

本发明属于菌株筛选技术领域，尤其涉及一种耐高温云耳菌株的室内筛选方法。

背景技术

广西栽培木耳有500余年历史，是广西4大食用菌之一。由于近年黑木耳市场价格稳定，经济效益明显，其栽培面积日益扩大。目前广西主栽的黑木耳品种大多数来自北方或浙江福建一带的中低温型品种。中低温品种在广西栽培，遇到暖冬气候，容易出现烂包，潮次减少，产量和品质下降。云耳是广西特有的黑木耳品种，耳片棕褐色，有光泽，半透明，入口嫩脆爽滑，口感极佳，因质量好曾在全国商品木耳评比中名列三甲，享誉海内外。尽管云耳在黑木耳品种中属于中偏高温型品种，但受高温气候影响仍然较大，因此云耳也主要集中在桂西北、或桂北山区栽培，广西大部分地区仍不能栽培。为了更好的推进广西云耳特色资源的开发利用，必须筛选出较耐高温的云耳菌株，扩大栽培区域。

目前食用菌高温菌株的筛选技术方法主要有两种方式：一是采取菌丝体热激法，即菌丝体在适宜培养条件下培养一定时间后，放入高温条件下进行热刺激1-8h,再取出放在正常温度25℃下进行恢复培养，测量菌丝的生长速度，淘汰耐高温能力差的菌株；二是菌丝体单一温度耐高温培养法，将刚接种后的菌丝放置于40℃高温条件下进行培养1-24h，再取出放在正常温度25℃下进行恢复培养，测量菌丝的生长速度，淘汰耐高温能力差的菌株。

综上所述，现有技术存在的问题是：一、黑木耳的菌丝体对高温有一定的忍耐性，菌丝体受短暂高温影响后，都可以正常地恢复生长。品种对高温条件忍受的时间越长，程度越大说明该品种的耐高温能力越强。目前菌丝体耐高温筛选方法中热处理培养时间短、高温条件单一、缺乏菌丝体由低温到高温驯化适应性、稳定性锻炼，因此筛选出的耐高温菌株缺乏代表性及稳定性。二、食用菌不同生育期，对高温的耐受性不尽相同。一个优良的耐高温品种，不仅菌丝体能耐高温，子实体也能耐高温出菇。目前食用菌高温品种筛选技术主要采用菌丝体耐高温筛选，子实体耐温筛选较少，因此筛选出的品种会出现菌丝体耐高温，但高温条件下不能正常出菇的问题。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种耐高温云耳菌株的室内筛选方法。

本发明是这样实现的，一种耐高温云耳菌株的室内筛选方法，所述耐高温菌株的室内筛选方法包括以下步骤：

步骤一，设置6个温度梯度，每个处理设3次重复；活化5d的菌株菌丝圆片接种到PDA综合培养基中央，分别置于25℃，28℃，31℃，34℃，37℃，40℃的培养箱中培养7d，观察菌丝生长情况，测量菌丝生长速率；

步骤二，活化好的菌株菌丝圆片接种到PDA综合平皿培养基中央，置于40℃培养箱中分别培养3d、5d、7d、9d、11d后，再移出放置于25℃恢复培养7d，每个处理设3个重复，观察菌丝生长情况，测量菌丝生长速度；

步骤三，供试菌株活化5d后，挑取菌落边缘菌丝块圆片接种于PDA综合平皿培养基中央，置于40℃下培养5d，取出在28℃下恢复培养7d；挑选萌发生长较好的菌丝块再接种于PDA综合培养基上，放到42℃培养3d，取出在28℃下恢复培养7d，再挑选萌发生长较好的菌丝块接种于PDA综合培养基上，置于45℃培养5h后；取出在28℃下培养7d；各个温度处理恢复生长7d后，观察菌丝生长情况，测量菌丝生长速度。

步骤四：供试菌株活化培养8d后，制作栽培菌种；栽培菌种满袋后，将栽培种接入出菇袋培养基中培养50d左右，将出菇袋分别放到25℃、28℃、31℃出菇条件下进行出耳，观察现蕾情况。

进一步，所述步骤一中菌丝生长速率(mm/d)＝菌落半径(mm)/生长天数(d)。

进一步，所述耐高温云耳菌株的室内筛选方法筛选的菌株TY041、TY026、TY071、HME2、YE1。

本发明的优点及积极效果为：菌株TY041、TY026、TY071、HME2、YE1、经不同温度下菌丝培养、40℃下高温培养处理后菌丝恢复、高温锻炼(40℃、42℃、45℃)，菌丝体的生长速度及菌丝长势均表现相对较稳定。所筛选的菌株经过长时间40℃高温培养后恢复生长速度比对照菌株916快10％以上。通过该技术方法筛选出的菌株现蕾出菇温度比对照菌株916提高了6℃。筛选出菌株不仅菌丝体较耐高温，而且能在高温区28-31℃正常现蕾，获得相对耐高温的种质资源材料，为今后选育适合广西地区栽培的耐高温优良云耳品种奠定基础。

附图说明

图1是本发明实施例提供的耐高温云耳菌株的室内筛选方法流程图。