[发明专利]一种耐高温云耳菌株的室内筛选方法在审
| 申请号: | 201711003977.9 | 申请日: | 2017-10-24 |
| 公开(公告)号: | CN107557307A | 公开(公告)日: | 2018-01-09 |
| 发明(设计)人: | 陈雪凤;吴圣进;王灿琴;吴小建;韦仕岩 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区农业科学院微生物研究所 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙)11491 | 代理人: | 黄耀钧 |
| 地址: | 530007 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 耐高温 菌株 室内 筛选 方法 | ||
1.一种耐高温云耳菌株的室内筛选方法,其特征在于,所述耐高温云耳菌株的室内筛选方法:设置菌株在6个温度梯度下培养7d,每个处理设3次重复;将活化5d的菌株菌丝圆片接种到PDA综合培养基中央,置于40℃下不同培养时间后取出恢复培养;供试菌株活化5d后,挑取菌落边缘菌丝块圆片接种于PDA综合平皿培养基中央培养,高温锻炼;供试菌株活化培养8d后,用于制作栽培菌种;栽培菌种满袋后,将栽培种接入出菇袋培养基中培养50d,将出菇袋分别放到出菇条件下出耳。
2.如权利要求1所述的耐高温云耳菌株的室内筛选方法,其特征在于,所述耐高温云耳菌株的室内筛选方法包括以下步骤:
步骤一,设置6个温度梯度,每个处理设3次重复;活化5d的菌株菌丝圆片接种到PDA综合培养基中央,分别置于25℃,28℃,31℃,34℃,37℃,40℃的培养箱中培养7d,观察菌丝生长情况,测量菌丝生长速率;
步骤二,活化好的菌株菌丝圆片接种到PDA综合平皿培养基中央,置于40℃培养箱中分别培养3d、5d、7d、9d、11d后,再移出放置于25℃恢复培养7d,每个处理设3个重复,观察菌丝生长情况,测量菌丝生长速度;
步骤三,供试菌株活化5d后,挑取菌落边缘菌丝块圆片接种于PDA综合平皿培养基中央,置于40℃下培养5d,取出在28℃下恢复培养7d;挑选萌发生长较好的菌丝块再接种于PDA综合培养基上,放到42℃培养3d,取出在28℃下恢复培养7d,再挑选萌发生长较好的菌丝块接种于PDA综合培养基上,置于45℃培养5h后;取出在28℃下培养7d;各个温度处理恢复生长7d后,观察菌丝生长情况,测量菌丝生长速度;
步骤四:供试菌株活化培养8d后,制作栽培菌种;栽培菌种满袋后,将栽培种接入出菇袋培养基中培养50d,将出菇袋分别放到25℃、28℃、31℃出菇条件下进行出耳,观察现蕾情况。
3.如权利要求2所述的耐高温云耳菌株的室内筛选方法,其特征在于,所述步骤一中菌丝生长速率(mm/d)=菌落半径(mm)/生长天数(d)。
4.一种由权利要求1~3任意一项所述耐高温云耳菌株的室内筛选方法筛选的耐高温云耳菌株,其特征在于,所述耐高温云耳菌株为TY041、TY026、TY071、HME2、YE1。
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