[发明专利]一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种多糖制剂的制备方法，具体涉及一种具有改善猪生产性能和免疫力的银耳多糖制剂。

背景技术

银耳属于真菌门隔担子菌亚纲银耳目银耳科银耳属，营养价值高的同时还具有较高的药用价值。传统中医学认为银耳性味甘、平，具有滋阴润肺、养胃生津、益气和血之功效。现有研究还表明，银耳具有抗肿瘤、抗炎、降血脂、提高机体免疫力等功效。现代医学研究表明，银耳中含有丰富的蛋白质、多糖、有机酸、粗纤维、多种微生物和微量元素， 而其中多糖占干重的 72%～78%。

养猪生产中，仔猪断奶会面临着生长环境、日粮转变和母子分离等应激因素，导致生长迟缓、肠道功能紊乱、抗病力差，进而影响断奶仔猪生长性能和健康。同时，随着高产母猪的选育和集约化养殖条件下的环境协迫，母猪也面临着繁殖力受阻、乳房炎和泌乳量低等生产问题。针对这些生产问题，过去的研究表明，黄芪多糖、白术多糖、刺多糖等能显著降低断奶仔猪腹泻率，调节肠道健康以及机体免疫力。母猪营养研究也发现，多糖能提高母猪繁殖性能，且在提高母体免疫力的情况下，还能进一步提高后代仔猪健康。

现代医学研究证明，银耳的主要活性成分是银耳多糖，银耳多糖主要分为酸性杂多糖、中性杂多糖、酸性低聚糖、胞壁多糖和胞外多糖五类。银耳多糖是由甘露糖、木糖、葡萄糖醛酸、核酸糖、半乳糖和葡萄糖等组成，还有少量的果糖和岩藻糖，其分子中有典型的乙酰基结构单糖组成，其化学结构是以α~(1→3)~d~甘露聚糖为主链，联接有β~d~葡萄糖醛酸和单一的或短链的β~(1→2)~木糖残基，连接在C~2位置。目前可以通过对银耳孢子深层发酵获得银耳多糖。

近年来，研究人员采用酶解提取法、超声波提取法、微波提取法和亚临界水萃取法等新兴技术，都在一定程度上提高了银耳多糖的提取率。酶解提取法有着多糖提取率高、反应条件温和、对多糖结构破坏小的优点，但由于酶的价格较贵，生产成本相对较高，不适合应用于大批量的工业生产。超声波提取法和微波提取法可以提高多糖的提取率，缩短提取时间，但有时会造成多糖提取物的组分更加复杂，给后续的分离纯化工序带来一定的难度。

基于上述分析，一种纯化浓度高、杂质含量少、提取率高、加工工艺科学简单，用于改善猪生产性能和免疫力的银耳多糖制剂是行业内急需的。

发明内容

鉴于上述不足，本发明通过大量的研究和实践，提供一种多糖粉制剂及其制备方法和应用。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术方案，实现工艺简单易操作、对环境友好、能得到高产的多糖及容易实现产业化的特点，具体如下：

一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）银耳孢子的分离与采集：从人工栽培银耳子实体或自然界天然野生的银耳子实体中分离采集银耳孢子，银耳孢子接种于土豆汁琼脂斜面上，25℃±1℃培养7~10天后备用；

（2）纯种银耳孢子的制备：取少许银耳孢子于1~2ml无菌生理盐水中，经适当稀释后涂布于载有9cm土豆汁琼脂培养基的培养皿上，25℃±1℃培养，待肉眼在培养皿上能观察到小白点样菌落时，无菌取样，在显微镜下能观察到类似于酵母样的孢子细胞时，接种于土豆汁琼脂斜面上，25℃±1℃培养7~10天后备用；

（3）银耳孢子种子液的制备：将土豆汁琼脂斜面上的银耳孢子接种于灭菌之后的液体培养基中，并置于28℃，250r/min条件下培养4d后得到银耳孢子种子液；

（4）发酵罐生长培养：取银耳孢子种子液1％接种量，接种于已灭菌的发酵液培养基于发酵罐容器中进行，通气流量1∶1，转速250r/min，28℃培养6天；取样后，银耳孢子经计数达到7×108~9×108个/ml，停止发酵生长，即为银耳孢子发酵液。

进一步的，步骤（3）所述液体培养基成分为土豆淀粉10g/L，葡萄糖20g/L，胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、氢氧化钠 1g/L，pH为6.5。

进一步的，步骤（3）所述灭菌条件为121℃下灭菌20min，待灭菌完成后，立即冷却培养基，减少碳化。

进一步的，步骤（4）所述发酵液培养基培养成分为土豆淀粉10g/L，葡萄糖20g/L，胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、氢氧化钠 1g/L，pH为6.5。

进一步的，步骤（4）所述灭菌条件为121℃条件下灭菌20min，待灭菌完成后，立即冷却培养基，减少碳化。