[发明专利]一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法

权利要求书

1.一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤：

（1）银耳孢子的分离与采集：从人工栽培银耳子实体或自然界天然野生的银耳子实体中分离采集银耳孢子，银耳孢子接种于土豆汁琼脂斜面上，25℃±1℃培养7~10天后备用；

（2）纯种银耳孢子的制备：取少许银耳孢子于1~2ml无菌生理盐水中，经适当稀释后涂布于载有9cm土豆汁琼脂培养基的培养皿上，25℃±1℃培养，待肉眼在培养皿上能观察到小白点样菌落时，无菌取样，在显微镜下能观察到类似于酵母样的孢子细胞时，接种于土豆汁琼脂斜面上，25℃±1℃培养7~10天后备用；

（3）银耳孢子种子液的制备：将土豆汁琼脂斜面上的银耳孢子接种于灭菌之后的液体培养基中，并置于28℃，250r/min条件下培养4d后得到银耳孢子种子液；

（4）发酵罐生长培养：取银耳孢子种子液1％接种量，接种于已灭菌的发酵液培养基于发酵罐容器中进行，通气流量1∶1，转速250r/min，28℃培养6天；取样后，银耳孢子经计数达到7×10⁸~9×10⁸个/ml，停止发酵生长，即为银耳孢子发酵液。

2.根据权利要求1所述的一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述液体培养基成分为土豆淀粉10g/L，葡萄糖20g/L，胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、氢氧化钠 1g/L，pH为6.5。

3.根据权利要求1所述的一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述灭菌条件为121℃下灭菌20min，待灭菌完成后，立即冷却培养基，减少碳化。

4.根据权利要求1所述的一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述发酵液培养基培养成分为土豆淀粉10g/L，葡萄糖20g/L，胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、氢氧化钠 1g/L，pH为6.5。

5.根据权利要求1所述的一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述灭菌条件为121℃条件下灭菌20min，待灭菌完成后，立即冷却培养基，减少碳化。

6.根据权利要求1所述的一种家畜用银耳多糖制剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述银耳孢子发酵液按照重量比1∶10的麦麸和银耳孢子发酵液比例混合，在不超过60℃的条件下烘干制备获得银耳孢子发酵物生物活性饲料添加剂产品，每克添加剂干粉含银耳孢子数15~20×10⁸个，添加剂干粉银耳孢子发酵物占15±1％。

7.根据权利要求1~6任意一项所述的制备方法所制得的家畜用银耳多糖制剂。

8.一种如权利要求7所述的家畜用银耳多糖制剂的使用方法，其特征在于，该银耳多糖制剂广泛用于猪、奶牛的饲料中喂饲，并能够取代动物饲料中的抗生素。