[发明专利]一种青木香的组织培养快繁方法在审
申请号: | 201710971638.3 | 申请日: | 2017-10-18 |
公开(公告)号: | CN107593444A | 公开(公告)日: | 2018-01-19 |
发明(设计)人: | 罗荣棋 | 申请(专利权)人: | 罗荣棋 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 玉林市振盛专利商标代理事务所45109 | 代理人: | 吴安仪 |
地址: | 537000 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 青木香 组织培养 方法 | ||
1.一种青木香的组织培养快繁方法,其特征在于包括以下工艺步骤:
(1)外植体的处理:选取健壮青木香植株上切取带腋芽的茎段作为外植体,剪去叶片,切成2长的带有3个腋芽的节段先用洗衣粉水冲洗4h,再用毛轻刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除,然后用自来水冲洗4h后置于超净工作台中,先用75%乙醇消毒32s后用无菌水洗6次,再用0.1%升汞溶液消毒12min,用无菌水冲洗8次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用;
(2)丛生芽导:将步骤(1)处理后的带腋芽茎段切成3.5cm小段并接种到诱导培养基上,先在24℃条件下全暗培养6天,然后置于每天光照15小时,光照强度为3500lx,直至诱导形成丛生芽;
(3)增殖培养:将步骤(2)培养获得的嫩芽长至约3cm时切离并转入增殖培养基上进行继代培养,接种后先在24℃条件下全暗培养5天,然后置于每天光照18小时,光照强度为2900lx,置于培养温度为29℃的条件下培养,多次反复切割进行继代培养,以得到更多的丛生芽;
(4)生根培养:当步骤(2)或(3)的丛生芽长至2.0cm高时,将丛生芽切割成单苗接种至生根培养基中进行生根培养,接种后先在24℃条件下全暗培养5天,然后置于每天光照18小时,光照强度为1900lx,培养温度为24℃的条件下培养直至长出根;
(5)试管苗移栽:当小苗长出的新根系长达4cm左右时,并且长出侧根,苗高6cm以上时,将培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗8天后,将试管苗从培养瓶中取出,洗掉根部培养基,尽量不伤害根部,栽入经灭菌过的蛭石中。
2. 根据权利要求1所述的一种青木香的组织培养快繁方法,其特征在于步骤(2)所述的诱导培养基为:MS+ 2mg/L NAA+ 0.4mg/L 6-BA+ 1.2mg/L KT+2.5%蔗糖+0.25%琼脂+0.12%活性炭,pH值为5.3。
3. 根据权利要求1所述的一种青木香的组织培养快繁方法,其特征在于步骤(3)所述的增殖培养基为:MS+3.5mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA+1.5%蔗糖+0.3%琼脂+0.12%活性炭,pH值为5.3。
4. 根据权利要求1所述的一种青木香的组织培养快繁方法,其特征在于步骤(5)所述的生根培养基为:MS+12mg/L KH2PO4+1.0%蔗糖+0.3%琼脂+0.12%活性炭,pH值为5.3。
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