[发明专利]一种N-甲基-美达霉素类化合物及其制备方法和应用有效
申请号: | 201710971315.4 | 申请日: | 2017-10-18 |
公开(公告)号: | CN107903277B | 公开(公告)日: | 2019-09-20 |
发明(设计)人: | 马忠俊;黄昀;陈芋宏;姜庆;张大杉;丁婉婧 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C07D493/04 | 分类号: | C07D493/04;A61K31/365;A61P35/00;C12P17/18;C12R1/465 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310013 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 甲基 美达 霉素 化合物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种N-甲基-美达霉素类化合物的制备方法,其特征在于,所述N-甲基-美达霉素类化合物,命名为3’-N-甲基-美达霉素,结构式如式I:
所述制备方法包括以下步骤:
(1)发酵培养放线菌获得发酵产物;
(2)发酵产物过滤去除菌丝体获得粗提物;
(3)粗提物分离纯化获得所述N-甲基-美达霉素类化合物,
其中,所述放线菌为Streptomyces cavourensis strain NRRL 2740,购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,发酵使用培养基由高氏一号液体培养基与海盐按10mL∶1g的比例配制。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中分离纯化方法如下:
(a)粗提物用乙酸乙酯萃取;
(b)萃取液浓缩后,使用硅胶柱色谱纯化,并用二氯甲烷体积占0%~20%的二氯甲烷-甲醇体系梯度洗脱;
(c)将包含目的化合物的洗脱产物合并后,使用凝胶柱色谱纯化,并用二氯甲烷体积占50%的二氯甲烷-甲醇体系洗脱;
(d)将包含目的化合物的洗脱产物合并后,使用高效制备液相色谱纯化获得所述N-甲基-美达霉素类化合物。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(a)中萃取方法为:用与粗提物等体积的乙酸乙酯萃取3次。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(b)中硅胶柱色谱纯化使用的填料为硅胶。
6.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(c)中凝胶柱色谱纯化使用的填料为羟丙基葡聚糖凝胶。
7.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(d)中高效制备液相色谱纯化使用的填料为十八烷基键合硅胶,流动相为体积浓度20%-100%的甲醇-水溶液,且流动相中还添加体积浓度0.5‰的三氟乙酸,以梯度洗脱。
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