[发明专利]一种光叶珙桐组培快繁方法

权利要求书

1.一种光叶珙桐组培快繁方法，其特征在于：它由下述步骤组成：

A:外植体获取：秋季9-10月份间，光叶珙桐叶片由青转黄且未落叶时，剪取一年生枝条，采集过程中需全程以湿报纸裹住保湿运输，做为外植体材料来源；

B:无菌茎段获取：截取光叶珙桐带芽茎段，顶芽留1.5-2cm茎段，侧芽上端留0.5cm，下端留1.5-2cm茎段，以800倍多菌灵浸泡20min，而后滴入2滴吐温，2-3滴洗洁精，充分搅匀，清洗后，用纱布盖好容器口，置于自来水下流水冲洗2h；冲洗后的材料于超净工作台上，先用75%酒精浸泡30s，而后直接将外植体投入0.1%升汞中消毒8min，无菌水冲洗5次，每次2min，材料上残留的水分用经灭菌后的吸水纸吸干；切去破损，褐化的部分，接种前切掉顶端和底端各2mm茎段，每个待接种茎段保留一个冬芽，接种于过渡培养基上，过度培养基为不添加任何植物生长调节剂的WPM基础培养基；培养室温度18-23℃，湿度50-70%，光照强度2200lx，每天光照时间12-14h，10d后转入诱导培养基；

C:侧芽的萌发诱导：经过30d的培养，挑选叶片展开良好，无菌，无变异的嫩芽，去掉老的茎段，单独留下新萌发的嫩茎，转入愈伤组织诱导培养基培养，接种时轻压外植体材料以使材料与培养基充分接触；培养室温度20-25℃，湿度50-70%，光照强度2200lx，每天光照时间12-14h，25d后可见白色或米白色或米白色疏松愈伤组织长出，待愈伤组织在切口处长成环状时，转入丛生芽诱导培养基培养；

D:丛生芽诱导与增殖：将愈伤长势良好，疏松、开始出现微小侧芽的幼苗，去掉已完全展开的叶片，接种于增殖培养基中，接种深度以幼苗刚好能站立为宜，培养室温度20-25℃，湿度50-70%，光照强度2200lx，每天光照时间12h，培养40d后，可见部分幼嫩的侧芽萌发，将侧芽切下继续增殖，长势较好的幼苗挑出；

E:壮苗生根培养：截取高3-5cm，叶3-5片的丛生苗，接种于壮苗生根培养基上，培养室温度18-23℃，湿度50-70%，光照强度2200lx，每天光照时间12h，培养20d后可得健壮的光叶珙桐生根苗。

2.根据权利要求书1所述的一种光叶珙桐组培快繁方法，其特征在于：步骤B中：所述光叶珙桐待接种外植体为带一个顶芽或侧芽的茎段。

3.根据权利要求书1所述的一种光叶珙桐组培快繁方法，其特征在于：步骤C中：所述接种时轻压时用镊子轻压。

4.根据权利要求书1所述的一种光叶珙桐组培快繁方法，其特征在于：步骤D中：培养至25d后，将愈伤长势良好，疏松、开始出现微小侧芽的幼苗，去掉已完全展开的叶片，接种于增殖培养基中，接种深度以幼苗刚好能站立。

5.根据权利要求书1所述的一种光叶珙桐组培快繁方法，其特征在于：步骤D中：培养40d后，光叶珙桐普遍能长至4-5cm高，截取高3-5cm，叶3-5片的丛生苗，接种于壮苗生根培养基上。