[发明专利]一种核酸适配体荧光试纸条及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201710969466.6 | 申请日: | 2017-10-17 |
| 公开(公告)号: | CN107796938B | 公开(公告)日: | 2020-03-27 |
| 发明(设计)人: | 陈爱亮;张桂兰;朱超;杨曙明 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
| 主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N33/559 |
| 代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 李佳 |
| 地址: | 100000 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 核酸 适配体 荧光 试纸 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种核酸适配体荧光试纸条,其特征在于,包括底板、样品垫、经氧化石墨烯改性的玻璃纤维膜、反应膜以及吸水垫,所述样品垫、所述经氧化石墨烯改性的玻璃纤维膜、所述反应膜以及所述吸水垫的端部依次连接形成检测层,所述检测层与所述底板连接,所述反应膜设有检测线和质控线,所述检测线设置于靠近所述经氧化石墨烯改性的玻璃纤维膜的一端,所述质控线设置于靠近所述吸水垫的一端;
所述经氧化石墨烯改性的玻璃纤维膜附着有荧光素标记的核酸适配体和/或荧光标记的带有连接序列的核酸适配体以及游离荧光素,所述检测线固定有所述核酸适配体的互补链或所述核酸适配体连接序列的互补链,所述质控线处设置有与所述荧光素相对应的抗荧光素抗体;
所述核酸适配体连接序列包括polyTn、polyAn、polyCn及polyGn中的一种,相对应的所述核酸适配体连接序列的互补链包括polyAn、polyTn、polyGn及polyCn中的一种,其中n为6~25的整数。
2.根据权利要求1所述的核酸适配体荧光试纸条,其特征在于,所述荧光素选自花青素5(Cy5)或羧基荧光素(FAM)。
3.一种如权利要求1或2所述的核酸适配体荧光试纸条的制备方法,其特征在于,包括:将所述样品垫、所述经氧化石墨烯改性的玻璃纤维膜、所述反应膜以及所述吸水垫依次粘贴至所述底板的同一侧。
4.根据权利要求3所述的核酸适配体荧光试纸条的制备方法,其特征在于,所述经氧化石墨烯改性的玻璃纤维膜的制备方法包括:将氧化石墨烯悬浮溶液喷洒至玻璃纤维素膜,在110~130℃的条件下干燥7~9h即得纳米材料,将所述荧光素标记的核酸适配体及游离荧光素滴加至所述纳米材料,反应15~25min,在35~40℃的条件下干燥。
5.根据权利要求4所述的核酸适配体荧光试纸条的制备方法,其特征在于,所述反应膜的制备方法包括:将生物素修饰的所述核酸适配体的互补链或所述核酸适配体连接序列的互补链与亲和素孵育25~35min,喷至所述检测线处。
6.如权利要求1或2所述的核酸适配体荧光试纸条在食品安全、环境监测以及临床诊断中的检测应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述核酸适配体荧光试纸条在检测磺胺二甲氧嘧啶的应用。
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