[发明专利]一种核酸适配体荧光试纸条及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种核酸适配体荧光试纸条及其制备方法和应用，涉及生物检测技术领域。一种核酸适配体荧光试纸条，包括底板、样品垫、纳米材料垫、反应膜以及吸水垫，反应膜设有检测线，检测线设置于靠近纳米材料垫的一端；纳米材料垫附着有荧光素标记的核酸适配体和/或荧光标记的带有连接序列的核酸适配体以及游离荧光素，检测线固定有核酸适配体的互补链或核酸适配体连接序列的互补链。试纸条结构简单，检测灵敏，准确度高。一种核酸适配体荧光试纸条的制备方法，包括：将样品垫、纳米材料垫、反应膜以及吸水垫依次粘贴至底板的同一侧。操作简单，灵活性强。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体而言，涉及一种核酸适配体荧光试纸条及其制备方法和应用。

背景技术

试纸条作为一种简单快速的分析工具已被广泛用于临床诊断、食品安全以及环境监测中。目前试纸条主要有胶体金和荧光两种检测方式，其中胶体金试纸条通过显色反应来显示结果，具有肉眼可见无需其他仪器的优点；但其缺点是灵敏度低，且只能通过比较颜色深浅达到半定量的目的。相对于胶体金试纸条，荧光试纸条灵敏度高，搭配便携式的荧光检测仪可以对样品中的靶标物进行精确定量，因此成为近年来试纸条发展的方向。

但是无论胶体金试纸条还是荧光试纸条，目前基本都是基于抗原抗体反应的试纸条，抗原抗体作为活性蛋白需要低温储运保存，因此货架期较短，限制了该技术在偏远条件落后地区的应用。而且由于很多小分子物质制备半抗原困难，难以刺激产生高亲和力的抗原抗体，更是限制了这一技术的应用。

核酸适配体是近年来新发现的一类识别分子，主要是指长度在10-100碱基之间的单链DNA，能够通过构象折叠后与靶标分子高亲和力高特异性结合。核酸适配体是通过体外筛选得来的，因此与抗体相比，其靶标不受限制，小到金属离子大到蛋白质分子都可以筛选适配体，筛选的适配体经测序后可以批量合成，易于修饰，稳定性好，能够代替抗体被用于各式各样的抗体分析方法中，因此也被成为化学抗体。

同样的核酸适配体也被代替抗体用于试纸条开发中，其原理类似于传统的试纸条。但是目前基于核酸适配体的胶体金或荧光试纸条并不多，其主要原因是不同适配体序列长度不一，大部分适配体序列比较长，因此和互补链形成双链的亲和力要大于适配体和靶标形成复合物的亲和力，因此导致已经结合了靶标的适配体在检测线处仍然发生解离，无法实现对靶标的精确检测。检测线固定抗原虽然使得竞争力一致，但对于很多小分子靶标来说与偶联蛋白结合后限制了与适配体的结合，使得适配体无法在检测线处结合，无法实现灵敏和准确检测。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提出了一种核酸适配体荧光试纸条，结构简单，检测灵敏，准确度高。

本发明又提出了一种核酸适配体荧光试纸条的制备方法，操作简单，灵活性强。

本发明是这样实现的：

本发明提出一种核酸适配体荧光试纸条，包括底板、样品垫、纳米材料垫、反应膜以及吸水垫，样品垫、纳米材料垫、反应膜以及吸水垫的端部依次连接形成检测层，检测层与底板连接，反应膜设有检测线和质控线，检测线设置于靠近纳米材料垫的一端，质控线设置于靠近吸水垫的一端；

纳米材料垫附着有荧光素标记的核酸适配体和/或荧光标记的带有连接序列的核酸适配体以及游离荧光素，检测线固定有核酸适配体的互补链或核酸适配体连接序列的互补链，质控线处设置有与荧光素相对应的抗荧光素抗体。

本发明提出一种核酸适配体荧光试纸条的制备方法，包括：将样品垫、纳米材料垫、反应膜以及吸水垫依次粘贴至底板的同一侧。

本发明提出一种核酸适配体荧光试纸条在食品安全、环境监测以及临床诊断中的应用。

上述方案的有益效果：