[发明专利]一种提高植物乳杆菌胞壁蛋白酶活力的培养基及其制备方法

说明书

一种提高植物乳杆菌胞壁蛋白酶活力的培养基及其制备方法，以每1000mL无菌水溶液所含的物质计，包括以下组分：葡萄糖10‑30g，酵母浸粉10‑30g、硫酸锰0.02‑0.05g、吐温800.5‑1.5g，菊糖1‑3g、酪蛋白胨3‑5g、磷酸氢二钠4‑7g、亮氨酸12‑18mg，黄瓜汁10‑20mL、初始pH值为7.0‑7.5。本发明提供的培养基，在常用基础培养基上添加了菊糖、亮氨酸、黄瓜汁，对提高植物乳杆菌胞壁蛋白酶的活力有很好的效果；且这些物质廉价易得，制作方法简单易行，利于大规模生产。

技术领域

本发明属于益生菌制品制备技术领域，涉及一种益生菌培养基的制备方法，特别涉及一种提高植物乳杆菌胞壁蛋白酶活力的培养基及其制备方法。

背景技术

乳酸菌(Lactic Acid Bacteria,LAB)是一类有益微生物，不仅存在于乳及乳制品中，也存在于人畜肠道中，是人体重要的益生菌。具有调节人体胃肠道正常菌群、保持微生态平衡，提高食物消化率和生物价，降低血清胆固醇，抑制肠道内腐败菌的生长繁殖和腐败产物的产生等作用。乳酸菌耐酸，适应肠道的生态环境，便于在人体肠道内繁衍增殖。如果因抗生素、化疗、年龄、饮食等因素引起体内菌群失调，通过口服这些有益菌的活菌制剂，可获得较好的治疗效果。长期食用含有乳酸菌活菌的食物，可使体内菌群的协调性增强，提高免疫力。

植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)是乳酸菌的一种，属于乳杆菌属，形状有时为短杆型，有时则成对或成链状出现，无芽胞产生，将其接入LBS琼脂培养基中生长时，呈现圆形、光滑细密的菌落，颜色为不透明的灰白色，为革兰氏阳性菌，其最适生长温度和最适pH值分别为30～35℃和6.5，能在10℃生长，在pH值4.5～9.5也可生长。植物乳杆菌是同型发酵乳酸菌，它能够发酵许多常见的糖类以产酸，经常存在于一些发酵食品中，例如一些蔬菜、酸乳饮料以及经过发酵的果汁中等，经乳酸菌发酵后的一些植物蛋白的植物乳酸菌饮品，既提升了口感，同时又保留了植物蛋白所具有的营养成分和保健功能。

植物乳杆菌的胞壁蛋白酶能与其他一些酶类共同作用水解乳蛋白，释放出不同的肽类以及一些游离的氨基酸，其中的一些肽类具有生物活性，如ACE抑制肽和抗氧化肽。在整个水解过程中，胞壁蛋白酶是其中最重要的酶，已有研究发现一些胞壁蛋白酶单独就可以水解乳蛋白并产生ACE抑制肽和抗氧化肽，而要使得ACE抑制率和抗氧化性的活性较高，必须保证胞壁蛋白酶的活力。

培养基的选择对于乳杆菌的生长有着非常重要的作用，直接影响到菌体的密度和生产周期。要得到高活菌数以及保持菌体好的代谢，首先必须筛选适合乳酸菌生长代谢的培养基。目前，植物乳杆菌大都采用MRS作为基础培养基，然后配合其他的生长因子来培养植物乳杆菌。任晓芬对嗜酸乳杆菌JQ-1产胞壁蛋白酶做了相关研究，以MRS为基础培养基，对其碳源(葡萄糖、乳糖、蔗糖)和氮源(牛肉蛋白胨、胰蛋白胨、大豆蛋白胨)进行正交实验，结果发现产胞壁蛋白酶的最佳碳源氮源组合为2％葡萄糖+1％牛肉蛋白胨。张重阳等对瑞士乳杆菌ATCC15019产胞壁蛋白酶的培养基成分及条件进行了研究，将MRS培养基中其他成分保持不变，采用正交实验设计优化碳源(葡萄糖、乳糖、蔗糖)和氮源(普通蛋白胨、牛肉蛋白胨、大豆蛋白胨)，最终发现0.5％蔗糖+1％牛肉蛋白胨为最佳组合。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高植物乳杆菌胞壁蛋白酶活力的培养基及其制备方法。

为达到上述目的，本发明的培养基以每1000mL无菌水溶液所含的物质计，包括以下组分：葡萄糖10-30g，酵母浸粉10-30g、硫酸锰0.02-0.05g、吐温80 0.5-1.5g，菊糖1-3g、酪蛋白胨3-5g、磷酸氢二钠4-7g、亮氨酸12-18mg，黄瓜汁10-20mL、初始pH值为7.0-7.5。

本发明的制备方法，包括以下步骤：

1)黄瓜汁的制备：将新鲜的黄瓜清洗干净并去皮，切块后加入蒸馏水打浆，即得到黄瓜汁；