[发明专利]一种制备单细胞固定针的装置及方法有效
申请号: | 201710965562.3 | 申请日: | 2017-10-17 |
公开(公告)号: | CN107794210B | 公开(公告)日: | 2020-12-04 |
发明(设计)人: | 汪夏燕;武园园;邵云龙;王亚楠;张奇;郭广生 | 申请(专利权)人: | 北京工业大学 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C03B23/09;C03B33/085 |
代理公司: | 北京思海天达知识产权代理有限公司 11203 | 代理人: | 张立改 |
地址: | 100124 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制备 单细胞 固定 装置 方法 | ||
1.一种制备单细胞固定针的方法,其特征在于,采用的装置包括:一根用毛细管拉制器拉制的带尖端的玻璃毛细管(1)、镍铬合金丝(2)、涂覆有不导电、耐高温涂层的金属螺纹杆(3)、石英片(4)、调压器(5)、导线(6)、倒置显微镜(7)、三维调节台(8);在涂有涂层的金属螺纹杆(3)的表面平行缠绕镍铬合金丝(2),缠绕有镍铬合金丝(2)的金属螺纹杆(3)固定在石英片(4)上,缠绕金属螺纹杆的镍铬合金丝(2)的一端固定在石英片(4)上,另一端伸出石英片(4)的边缘再折回到石英片(4)上,在石英片(4)边缘的悬空处形成镍铬合金丝环尖头;
镍铬合金丝(2)的两端分别通过导线与调压器(5)的输出端连接;带尖端的玻璃毛细管(1)固定到三维调节台(8)上,调整带尖端的玻璃毛细管(1)位于镍铬合金丝环尖头附近,采用倒置显微镜(7)观察制备过程;
采用上述装置进行单细胞固定针的制备方法,包括以下步骤:
S1.购买普通玻璃毛细管,用毛细管拉制器将其拉断,制作成带尖端的玻璃毛细管(1),备用;
S2.取一段金属螺纹杆,用耐腐蚀、耐高温、不导电的涂层涂覆金属螺纹杆,使涂层将金属螺纹杆全部覆盖,放在85℃的加热台上,使涂层的溶剂全部挥发,并在85-120℃的温度下继续加热2h-4h,使涂层完全固化在金属螺纹杆上,制作成带涂层的金属螺纹杆(3);
S3.取一段镍铬合金丝(2),将其缠绕在带涂层的金属螺纹杆(3)上,将镍铬合金丝(2)在带涂层的金属螺纹杆(3)缠绕的起始和末了的位置用高温涂层固定,两端各留出一段镍铬合金丝;
S4.购买石英片(4),将缠绕固定有镍铬合金丝(2)的带涂层的金属螺纹杆(3)固定于石英片(4)上,并将带涂层的金属螺纹杆(3)留有的镍铬合金丝(2)的一端在石英片(4)的一端边缘伸出并折回固定,在石英片(4)边缘的悬空处形成镍铬合金丝环尖头伸出石英片;
S5.取两根导线(6),分别与固定于石英片(4)的镍铬合金丝(2)两端相连;
S6.购买调压器(5)一个,输入端连接电源,输出端与连接镍铬合金丝(2)的两根导线(6)相连;
S7.将固定有镍铬合金丝(2)的石英片(4)放于倒置显微镜(7)载物台上,在倒置显微镜下找到镍铬合金丝环尖头的像;
S8.将带尖端的玻璃毛细管(1)固定在三维调节台(8)上,调整带尖端的玻璃毛细管(1)尖端的位置,将带尖端的玻璃毛细管(1)的尖端调到在倒置显微镜下能看到镍铬合金丝环尖头的视野内,将带尖端的玻璃毛细管(1)的尖端慢慢靠近镍铬合金丝环尖头,留有一段距离;
S9.打断:打开调压器(5),对镍铬合金丝(2)施加电压,经过实验找到镍铬合金丝环尖头将带尖端的玻璃毛细管(1)打断的施加电压范围,将电压调节到比该范围较低的电压进行预热,带尖端的玻璃毛细管(1)所要打断的位置到镍铬合金丝环尖头附近,并将带尖端的玻璃毛细管(1)与镍铬合金丝环尖头接触,调整电压到打断电压范围内所需值,几秒钟后,确认镍铬合金丝环尖头与带尖端的玻璃毛细管(1)的表面相粘连,快速将带尖端的玻璃毛细管(1)与镍铬合金丝环尖头沿毛细管轴向方向分离,在倒置显微镜下将看到尖端被打断的玻璃毛细管(A);
S10.收口:将调压器(5)的电压值调大,此时在倒置显微镜(7)中可以看到镍铬合金丝(2)开始发出红色的热光,将调压器(5)调至使尖端被打断的玻璃毛细管(A)尖端端面熔化收口所需电压范围更低一些的位置,把尖端被打断的玻璃毛细管(A)尖端端面靠近镍铬合金丝环尖头附近正对的位置上,为避免电热丝产生的热量损害物镜镜头,将镜头下调,而后经调压器(5)调至端面熔化收口所需电压,对端面进行熔化收口;
检查尖端收口情况,先将调压器(5)施加的电压调小,再用物镜靠近,检查状况,若收口还没有达到预期结果,则重复该收口操作;
S11.尖端被打断的玻璃毛细管(A)尖端端面熔化收口完成后,用镍铬合金丝环尖头对尖端熔化收口的玻璃毛细管(B)前端进行弯折,在倒置显微镜(7)中同时看到镍铬合金丝环尖头和尖端熔化收口的玻璃毛细管(B)前端,将调压器(5)调节到弯折所需温度的对应的电压更低一些的电压处,将尖端熔化收口的玻璃毛细管(B)前端需要弯折的位置,靠近镍铬合金丝环尖头位置,将倒置显微镜(7)物镜镜头下调节,把电压调到弯折所需电压处,将尖端熔化收口的玻璃毛细管(B)前端继续靠近镍铬合金丝环尖头,在倒置显微镜(7)下,观察尖端熔化收口的玻璃毛细管(B)前端弯折的程度,随时将调压器(5)电压调小,终止弯折,得到前端弯折后的玻璃毛细管(C)。
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